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用Amp-FLP方法分析江浙沪汉族人群DIS80位点多态性 Analysis of DlS80 VNTR Polymorphism in Chine
遗传 HEREDITAS(Beijing)18(4):15-181996
用Amp-FLP方法分析江浙沪汉族人群D1S80位点多态性
冯 哲 张雁征 杨 颖 张工梁
上（海血液中心，上海愉血研究所免疫遗传室，上海 200051)
陈仁彪
上（海第二医科大学医学遗传学教研室，上海 200025)
摘 要 采用PCR结合PAGE电泳及银染技术，即Amp-FLP方法，分析了148名江浙沪汉族人中
DIS80位点的多态性分布，观察到20种等位基因，53种基因型．首次在国际上发现重复单元数为39的
等位基因。该位点观察杂合性为0.86，个体鉴别力为0.96，多态性信息含量为0.83，基因频率分布符合
Hardy-Weinberg法则．本文结果提示，采用Amp-FLP技术分析D1S80位点多态性，样本分型具有较
高的准确性及灵敏度，适用于人类民族演变、法医学个体指认、亲子鉴定、遗传病基因连娜分析等研究
领域。
关键词 DIS80位点，Amp-FLP,VNTR
AnalysisofD1S80Vle1TRPolymorphisminChineseHansinJiangsu,
ZhejiangandShanghaiRegionsUsingAmp-FLPTechnique
FengZhe ZhangYanzheng YangYing ZhangGongliang
(ImmunogenetiesLaboratory,ShanghaiInstituteofBloodTransfusion,ShanghaiBloodCenter,Shanghai200051)
Chen Renbiao
(DepartmentofMedicalGenetics,ShanghaiSecondMedicalUniversity,Shanghai200025)
遗传学研究发现，人类基因组DNA的某些位点含有重复数目可变的非编码核心单元，称为可变数串连重复序
列(Variablenumberoftandemrepeats,VNTR).VNTR的高度多态性，可以为人类基因组DNA的识别提供重要
标记，适用于人类民族演变研究、法医学个体指认，亲子鉴定，遗传病基因连锁分析等方面．DIS80是以16bp为
核心单元的VNTR位点。Kasai首先用PCR方法证实D1S80位点的多态性 7（)．此后，Budowle等 1（991),、
Sajantila等1（992)(9)、孙光云等 1（994)cs〕分别在美国白人、芬兰白人、成都汉族人中对D1S80位点进行了研
究．本文使用扩增片段长度多态性a（mplifiedfragmentlengthpolymorphism,Amp-FLP)，即PCR技术结合高分
辨率PAGE电泳及高灵敏度银染技术，分析了148名江浙沪地区汉族人D1S80位点的遗传多态性．
1材 料 和 方 法
1.1材料
1.1.1样本采集 采集148名父母祖籍均为江浙沪地区无血缘关系的汉族人外周静脉血，EDTA抗凝．
1.1.2DIS80特异性引物：
28bp5-GAAACTGGCCTCCAAACACTGCCCGCCG-3
29bp5-GTCTTGTTGGAGATGCACGTGCCCCTTGC-3
16 遗 传HEREDITAS(Beijing)1996 18卷
均由中国科学院上海植物生理研究所合成，Taq酶等试剂均购自华美生物工程公司，D1S80ladder购自Perkin
Elmer公司。
1.2方法
1.2.1DNA抽提 采用经典酚一氯仿抽提法．
1.2.2PCR扩增 反应总体积50ul，含20ngDNA,1umol/L引物，200umol/LdNTP,2.5uTaq酶.PCR反
应条件：95C1分钟：65℃1分钟；721;1分钟，30次循环后72℃延伸10分钟。
1.2.3PAGE电泳 取6plPCR产物上样，使用D1S80ladder作指示，14V/cm，电泳5小时 l（o)
1.2.4银染 按Budowle等 1（991）方法略作改动 5（)．
1.2.5统计分析
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