生物化学第章前.ppt

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生物化学第章前

* * * * 最下面是甘氨酸的盐酸盐;中间是等电甘氨酸溶液;上面是甘氨酸钠;可以从这三个地方任何地方开始。从中间开始的话,当0。1mol甘氨酸溶于水,溶液的pH约为6。如国用标准NaOH进行滴定,加入的摩尔数对pH作图,有一个拐点,有一半兼性离子变为阴离子;代入上面的公式;如果从下面,NaOH;上面的话,逐渐加入HCl;三元酸是;酸性滴定下面的两个;碱性滴定上面的两个 * 茚三酮反应(ninhydrin reaction):在加热条件下,氨基酸或肽与茚三酮反应生成紫色(与脯氨酸反应生成黄色)化合物的反应。 * * Thiocyanate--硫氰酸盐(或酯); Phenyl--苯; thio--硫; Hydantoin--乙内酰脲 * 异硫氰酸苯酯;苯氨基硫甲酰氨基酸;苯乙内酰硫脲氨基酸 * 茚三酮反应(ninhydrin reaction):在加热条件下,氨基酸或肽与茚三酮反应生成紫色(与脯氨酸反应生成黄色)化合物的反应。 * TRP * 基本原理一样;可以用于分离分析生物大分子,也可用于分离生物小分子 * 基本原理一样;可以用于分离分析生物大分子,也可用于分离生物小分子 * A—动相;B—静相 * 有效分配系数可以根据两相的体积比而加以改变;分离首先两个氨基分配系数要有差异;可以通过调整动相和静相的物质组分加大氨基酸之间有效分配系数的差异, * * * 生物膜主要由蛋白质、脂质、糖类组成;细胞膜、叶绿体、线粒体、内质网等膜都是由蛋白质和脂质组成的;细胞质中除了含有以上说的细胞器外,还有一个组成细胞质的重要结构,即细胞骨架。细胞骨架可以使细胞形状稳定,细胞质组织化,并且能产生运动。细胞骨架由微丝系、微管系统、和中间纤维系统;微丝由肌动蛋白、肌球蛋白和肌动蛋白的结合蛋白组成;微管系统由微管及微管结合蛋白组成、中间纤维系统是介于微管系统和微丝系统之间。 * 一般将NH2放在左边,COOH放在右边,除了特别说明外,注意方向性;主链是相同的;氨基酸不同,R也就不同;主链有三种键;N-Ca;Ca-C;C-N * 反过来就完全不同了 * 这是X衍射结果得出的 * * 如:催产素和升压素均为9肽,第3位和第9位氨基酸不同。催产素使子宫和乳腺平滑肌收缩,具有催产和促使乳腺排乳作用。升压素促进血管平滑肌收缩,升高血压,减少排尿。 * 如:催产素和升压素均为9肽,第3位和第9位氨基酸不同。催产素使子宫和乳腺平滑肌收缩,具有催产和促使乳腺排乳作用。升压素促进血管平滑肌收缩,升高血压,减少排尿。 * 催产素和升压素均为9肽,第3位和第9位氨基酸不同。催产素使子宫和乳腺平滑肌收缩,具有催产和促使乳腺排乳作用。升压素促进血管平滑肌收缩,升高血压,减少排尿。 * 具有两种重要的抗氧化作用和整合解毒作用。谷胱甘肽(尤其是肝细胞内的谷胱甘肽)具有非常重要的生理作用就是整合解毒作用,能与某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、重金属)等结合,参与生物转化作用,从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质,排泄出体外。谷胱甘肽的另一主要生理作用是做为体内一种重要的抗氧化剂,它能够清除掉人体内的自由基,清洁和净化人体内环境污染,从而增进了人的身心健康。 * 还原性谷光苷肽在 红细胞中作为巯基缓冲剂存在,维持血红细胞和红细胞其他蛋白质的半胱氨酸残基处于还原态。 拆分蛋白质分子的多肽链,并分离出每条肽链。如果待测蛋白质由几条肽链组成,并且链间靠非共价键连接,用变性剂如8M 尿素或高浓度盐等处理,使拆分;若靠二硫键连接,那么就需要用氧化剂或还原剂断裂二硫键分离,普遍用的是过量的巯基乙醇处理,可以使S-S定量还原为SH,同时系统中需要加入8M尿素等,使蛋白变性,这样还原剂才能作用于S-S,然后用烷基化试剂如碘乙酸保护还原时生成的SH,防止重新被氧化。并根据他们的大小或电荷的不同分离出各多肽链。 二硫桥的断裂 氨基酸组成的分析-必不可少的(可以推断用不同的酶切可能有几个片段) 一般用酸水解,得到氨基酸混合物,再分离测定氨基酸。目前用氨基酸自动分析仪,2-4小时即可完成。 蛋白质的氨基酸组成,一般用每分子蛋白质中所含的氨基酸分子数表示。不同种类的蛋白质,其氨基酸组成相差很大。 (五)多肽链的部分裂解和肽段混合物的分离纯化 肽段的分离纯化可用层析法或电泳法 可以用酶水解法或化学水解法将蛋白质水解成肽段 二硫键在酸性条件下稳定,确定其位置时常用胃蛋白酶 肽段的分离纯化可用层析法或电泳法 溴化氰断裂法 经60次循环,准确度为:0.9960=0.54 肽段的测定—苯异硫氰酸酯 质谱法:可分析微量的肽链,短肽在第一台质谱仪中经电喷射电离,按荷质比分离,依次在经碰撞池被裂解成离子碎片,在第二台质谱仪中测出各个离子碎片的

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