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发酵工程 4工业发酵灭菌 第四章 工业发酵灭菌 ； 第一节 灭菌的方法 2、影响培养基灭菌效果的因素 1．分批灭菌：将配制好的培养基放在发酵罐或其他容器中，通入蒸汽将培养基和所有设备仪器灭菌的操作过程，也称实罐灭菌。 2. 连续灭菌（连消） 将配制好的培养基在高温快速的情况下，向发酵罐输送的同时经过加温，保温，冷却的过程进行灭菌。 第三节 空气除菌 二、空气除菌的方法 二、空气除菌的方法 二、空气除菌的方法 二、空气除菌的方法 空气的过滤除菌 1). 纤维及颗粒状介质的过滤器 ：用于总过滤器。 棉花：未脱脂棉花， 纤维直径为16-20μm， 其实密度为1520Kg/m3。填充率为8.5-10%。 玻璃纤维：用无碱的玻璃纤维介质作为过滤介质。纤维直径为3-20μm， 其实密度为2600Kg/m3。填充率为5-11%。 活性炭：常与纤维状介质分层堆放成过滤床。 通过过滤器的气流速度一般为0.2-0.3m/s, 相应的压力降也较小。 过滤器进行灭菌时，一般是自上而下通入0.2-0.4 Mpa的蒸汽，灭菌45min后用压缩空气吹干备用。总过滤器约每月灭菌一次。 介质:超细玻璃纤维纸。 孔径:1-1.5μm 厚度: 0.25-0.4mm 实密度:2600Kg/m3 填充率:14.8%。 3）金属烧结管空气过滤器： 压缩空气进入壳程，通过金属微孔滤管的壁除去杂菌和颗粒，得到的无菌空气由管程排出。 4）微孔膜过滤器----绝对过滤器： 由耐高温，疏水的，厚度为150μm的聚四氟乙烯薄膜构成。能绝对滤除所有的大于0.01μm 以上的微粒，能除去几乎所有空气中夹带的微生物。 三、空气净化的流程 1. 空气的预处理 1). 采风塔: ≥10m ,上风头, 流速8m/s. 2). 粗过滤器:前置过滤器, 拦截空气中较大的灰尘以保护空气压缩机,同时减轻总过滤器的负担.过滤介质采用泡沫塑料或无纺布.实际流速为0.1-5 m/s. 3). 空气压缩机: 提供动力以克服随后各设备的阻力. 4). 空气贮罐: 主要为消除压缩机空气的脉动, 特别是对于往复式空压机. 5). 冷却器: 温度120℃左右,必须冷却。降湿。 6). 气液分离设备: 除去空气中的水和油保护过滤介质.有利用离心力沉降的旋风分离器,和利用惯性拦截的介质分离器. 旋风分离器：利用离心力进行气液和气固沉降分离的设备。结构简单，阻力小，分离效率高。可去除空气中绝大多数的20μm以上的液滴。但是10μm左右的液滴，除去效率只有60-70% 。 丝网除沫器：可除去1μm以上的雾滴，去除率为98%。 7）.空气加热设备 此时的压缩空气湿度为100% 2、空气净化的流程： 1）.两级冷却，加热除菌流程 特点：两次冷却，两次分离，适当加热。 适应性广，充分分离油水，节约冷却水。 2）.冷热空气直接混合式空气除菌流程 特点：省去第二冷却后的分离设备和空气再加热设备， 流程比较简单，冷却水用量少。适用于中等湿度的地区。 3）.高效前置过滤空气除菌流程 3．影响介质过滤效率的因素： 介质过滤效率指被介质层捕集的尘埃颗粒与空气中原有颗粒数之比。 η = N1-N2/ N1 过滤 介质 绝对过滤 深度过滤 介质的空隙小于被拦截的微生物大小，如用聚四氟乙烯或纤维素酯材料做成的微孔滤膜。 介质孔隙大于被拦截的微生物大小，但介质有一定厚度，机理是静电，扩散，惯性及拦截作用。 如棉花过滤器，超细玻璃纤维纸，金属烧结管等。 玻璃纤维 活性炭 棉花 介质 除菌效率高，阻力小，强度低。 用酚醛树脂，甲基丙烯酸树脂等处理以提高防湿能力 用多孔板夹住提高其抗冲击能力。 2). 滤纸过滤器： 使用寿命长，耐高热，气体阻力小，安装维修方便。 空气预过滤器和蒸汽过滤器。 过滤器体积小，处理量大，压降小，除菌效率高 粗 过 滤 器 一 级 冷 却 器 空 气 加 热 器 分 过 滤 器 无 菌 空 气 二 级 冷 却 器 分 水 器 空 气 贮 罐 旋 风 分 离 器 空 气 压 缩 机 丝 网 除 末 器 空 气 吸 气 口 总 过 滤 器 *6无菌保障 *6无菌保障 提取 困难 pH 噬菌体 细胞裂解 产率下降 污染 的危害 无菌的保障 设备无死角 种子，培养过程加入的物料无污染。 培养基和生产环境灭菌 好氧发酵过程空气除菌； 灭菌（除菌）的方法 培养基和发酵设备的湿热灭菌 第四章 工业发酵灭菌 空气除菌 1、干热灭菌法 常用烘箱，灭菌条件为在16