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- 2018-06-26 发布于福建
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细胞工第六章 植物原生质体培养和体细胞杂交
原生质体培养的意义 (1)建立单细胞无性系 (2)用于原生质体融合 (3)遗传转化的良好受体 (4)多种基础理论研究的实验材料 1、原生质体培养方法 (1)液体浅层培养 优点:原生质体在液体环境中有较强的吸收营养物质的能力,表现出较强的细胞分裂能力。操作简单,对原生质体的损伤小,且易于添加新鲜培养基和转移培养物。 缺点:原生质体分布不均匀,常常发生原生质体之间的粘连现象而影响其进一步的生长和发育。此外,难以跟踪观察某一个细胞的发育情况。 (2)固体平板培养 优点:使原生质体处于固 定位置,避免了原生质体的 漂浮游动,有利于对单个原生质体的细胞壁再生及细胞团形成的全过程进行定点观察。 缺点: 培养基温度对薄层质量和原生质体分布有一定影响;另外,固体中单细胞生活能力弱,通气状况不良,第一次细胞分裂时间会推迟2d左右。 (3)液体-固体双层培养法 优点:固体培养基中的营养物质 可以缓慢放到液体培养基中,如果在下层固体培养基中添加一定量的活性炭,则还可能吸附培养物产生的一些有害物质,促进原生质体的分裂和细胞团的形成。 缺点:不易观察细胞的发育过程。 2、植株再生过程 植株(原生质体)再生过程是指分离、纯化的原生质体在适当的培养方法和良好的培养条件下,很快恢复细胞壁,再生细胞持续分裂形成细胞团,最后或通过愈伤组织或通过胚状体分化出完整植株的
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