白芷总香豆素的纯化与工艺研究.doc

白芷总香豆素的纯化与工艺研究 随着人们对回归自然的呼声日益高涨和对化学药品毒副作用的认识及对健康要求的不断提高,天然药物的用途和需求不断扩大, 中药的优势和特色越来越被世界重视,存在着巨大的国际市场。但近年来中药出口呈下降趋势。主要由于中药生产工艺落后,产品科技含量低、质量差造成的，所以在中药行业引入新型分离技术才能使中药行业走向现代化。 1.新型分离技术 近年来出现的新方法有大孔树脂吸附提取技术、声提取技术、膜分离技术及超临界流体萃取技术。生物碱是中药有效成分中非常重要的一类，主要存在于植物界， 生物碱的生物活性是多方面的。已用于临床的数十种，如吗啡是很好的镇痛药，利血平是常用的降压药等。 还有些生物碱有抗癌作用，如长春新碱、美凳素碱、紫杉醇等能提取生物碱的中草药有马蓝、蓼蓝、松蓝、洋金花、马钱子光姑子等香豆素广泛存在于高等植物中 许多香豆素及其苷具有抗菌、抗维生素。和光敏作用等生物活性木脂素是双分子苯丙素聚合成的天然化合物， 广泛分布于植物界，具有抗癌、保肝、镇静和肌肉松驰等多种生物活性。 超临界萃取用于香豆素和木脂素的提取是一种非常有效的方法 采用多级分离或与超临界精馏相结合可以得到有效成分含量很高的提取物 对于游离态的香豆素和木脂素一般只需用纯超临界即可， 对于分子量较大的或极性较强的成分则要加入适当的提携剂适当控制温度、压力、时间可从许多药用植物中提取香豆素和木脂素 如蛇床子中的香豆素的提取以下效果最好 芹菜中香豆素和木脂素在,压力下萃取#提取油中有效成分是常规水提法的常用的中药材，用优选的萃取条件，以纯超临界从中直接提取出含量高于的高品质提取物厚补酚，可直接作药剂日用品的原料。 提取方法 2.1渗漉法 香豆素成分是白芷的主要活性成分,经实验证明,欧前胡素是白芷香豆素的基础成分之一,因此,本实验采用欧前胡素作为对照品,于300 nm处测定白芷总香豆素含量,并以此作为评价指标筛选最佳工艺,控制制剂质量是可行的。溶媒考察时,本着以工业生产制剂为目的,考虑到经济、安全等因素,因此该实验仅对水和乙醇两种溶媒进行了考察。 在进行粒度考察时 , 20目和40目的白芷药材颗粒提取得到的总香豆素的含量差异不大,考虑到粉碎困难、节能降耗等因素,从生产的综合效益出发,选择20目的白芷药材进行提取。经研究,白芷香豆素虽可溶于沸水,但其中欧前胡素易于发生Claisen烯丙基重排,生成别欧前胡素,即使在真空中加热也会引起这样的变化 ,因此,虽然热回流法和渗漉法在提取效果上差别不大,但由于提取时间较长,温度较高,不利于香豆素类成分的提取。 因此,采用乙醇渗漉法是可取的。该方法最佳工艺条件的确定为热不稳定性成分的提取提供了一个可借鉴的方法。 2.2酸碱法 称取一定量生药蛇床子(100g) ,加8 倍量稀碱溶液,浸润5min ,加热至沸腾,煎煮一定时间后,立即以绸布过滤,滤液即刻加入己配制好的10 %浓度的盐酸溶液,边加边不断搅拌,调pH 至4 左右,即析出土褐色沉淀物,然后倾去上清液,沉淀物以蒸馏水洗至中性,以2500r/ min 离心30min ,得提取的总香豆素,于50 ℃以下鼓风干燥,称重。 香豆素类成分的分析与评价 白芷性温,味辛,具有祛风除湿、通窍止痛、消肿排脓等功效 ,是治疗头风眩晕效果很好的古方都梁丸中的一味君药。 从超临界萃取物的样品中共鉴定出15 种香豆素,其中主要成分为氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素等,其相对于总香豆素的百分含量分别达到42. 40 % ,22. 14 %和12. 12 %。正交实验方差分析结果表明萃取压力、萃取温度、萃取时间、药材颗粒度、分离压力等因素对萃取结果都有非常显著的影响,分离温度的影响较小。超临界CO2 萃取中药白芷有效成分的最佳条件为: 萃取压力21 MPa , 萃取温度50 ℃,萃取时间3 . 0 h ,颗粒度20目,分离压力6. 5 MPa ,分离温度30 ℃。 白芷中的主要药用有效成分为香豆素类化合物,具有一定的极性,加入夹带剂可以适当降低萃取压力,提高萃取率,但夹带剂的加入会带来夹带剂和有效成分的2 次分离问题,因此正交试验没有将夹带剂作为一个试验因素进行考虑。 为了考察夹带剂对萃取率的影响,将75 %的乙醇加入最佳萃取条件下的萃余物中作为夹带剂,在萃取压力21 MPa 、萃取温度50 ℃、颗粒度20 目、分离压力6. 5 MPa 、分离温度30 ℃下的条件下进行2 次萃取1 h ,结果几乎没有得到萃取液。这说明在最佳萃取条件下,白芷的药用有效成分已萃取的比较完全,无需加入夹带剂。 3