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氨苄青霉素残留检测方法研究进展 动物医学进展,2008,29(8):91—96 ProgressinVeterinaryMedicine 氨苄青霉素残留检测方法研究进展 阮祥春,曾明华 (安徽农业大学动物科技学院.安徽合肥230036) 摘要:随着人民生活水平的提高,畜禽产品中药物残留日益受到重视.氨苄青霉素在兽医临床应用广 泛,残留在畜禽产品中危害人体的健康.论文综述了氨苄青霉素的残留状况和氨苄青霉素残留检测方法的 研究进展. 关键词:氨苄青霉素;残留;检测方法 中图分类号:$859.796文献标识码:A文章编号:1007—5038(2008)08—0091—06 国内外已对氨苄青霉素(ampicillinAmp)的残 留进行了多方面研究,像早期的微生物检测法,还有 目前的胶体金检测技术等,为了更深入,更全面地了 解,现将国内外有关氨苄青霉素的残留检测方法做 一 综述. 1氨苄青霉素残留状况 1.1氨苄青霉素的应用 氨苄青霉素是半合成的青霉素,耐酸不耐酶,内 服或肌肉注射均易吸收,对大多数革兰氏阳性菌的 效力不如青霉素.氨苄青霉素是在青霉素G侧链 羧基的a位引入氨基,改变了它的极性,使其更容易 透过细菌细胞膜,扩大了抗菌谱.氨苄青霉素对革 兰氏阴性菌,如大肠埃希菌,变形杆菌,沙门菌等均 有较强的作用.同时它具有耐酸的特征,避免了天 然青霉素不宜内服的缺点,这就为临床给药提供了 很大的方便,在临床上得以广泛应用. 1.2氨苄青霉素残留危害 氨苄青霉素临床不良反应主要以过敏性皮疹, 过敏性休克和胃肠道反应为主.引起人产生不同程 度的过敏药疹反应,发病的几率约为8%.吴永娥 等[1报道,氨苄青霉素对人过敏反应以药疹为主要 临床表现.董艳萍等[2在临床上用氨苄青霉素 6.0g溶于500mL5%葡萄糖,静脉注射,用药后 5rain,病人出现呼吸困难,颜面潮红,心率升高,血 压下降.另外还有一些罕见的不良反应,如过敏性 心肌炎[3,血小板减少[4等,且氨苄青霉素与青霉素 之间尚有交叉过敏性以及细菌产生耐药性等危 害L5],往往也容易被忽视. 1.3氨苄青霉素的残留现状 国家质检总局的一项对中国北方市场的检测调 查结果显示,在近800份乳品采样中,抗生素残留超 标居不合格项目第1位.目前,在鸡,鹅,牛奶等动 物体内均检测到了氨苄青霉素的残留,各个国家对 畜禽产品中的氨苄青霉素的残留都非常重视.香港 《公众卫生规例》规定,从2001年l2月31日起实施 监管氨苄青霉素.日本2006年5月开始实施的”肯 定列表”制度明确将氨苄青霉素列为进口食品必检 项目.2002年12月,我国农业部规定,氨苄青霉素 在可食组织中的最高残留限量均为50~g/kg,农业 部制定的氨苄青霉素在牛奶中的最高残留限量 (MRI)为4肚g/L,并列入残留研究计划.我国及世 界其他国家均要求在进出口食品中对氨苄青霉素进 行检测.虽然我国已制定《动物性食品中兽药最高 残留限量》以及饲料药物添加剂使用规范》,但兽药 残留现象仍然十分严重. 2氨苄青霉素残留检测方法 2.1微生物检测法 微生物检测法是较为传统的抗生素残留检测手 段,应用广泛主要有杯碟法,TTC法,亮黑还原法, CHARM抑制法等.其测定原理是基于抗生素对微 生物的生理机能和代谢的抑制作用.微生物法检测 氨苄青霉素在屠宰动物组织中残留具有样品处理简 便,回收率高,可靠,快速,简便,易推广,不需特殊设 备等优点. 2.1.1纸片法纸片法又称PD(paperdisc)法,是 以圆滤纸从待测物(如肉类,乳等)取样,与含有枯草 收稿日期:2008—05—22 作者简介:阮祥春(1980～).男.安徽无为人,助理实验师,主要从事动物源性食品安全研究.*通讯作者 92动物医学进展2008年第29卷第8期(总第180期) 杆菌等细菌的营养琼脂贴合,再放人含有标准抗生 素的阳性对照滤纸片,经培养,通过观察抑菌圈大小 判定有无抗生素残留.选用的菌种决定了能检出的 抗生素种类,用嗜热脂肪芽孢杆菌纸片检测法仅适 用于检测口一内酰胺类抗生素,但能暗示是否还存在 其他抑菌物质,灵敏度可达0.008单位以下,此法具 有广域的灵敏性.随着对纸片微球法进行了改进研 究,从枯草杆菌,藤黄菌和蜡样芽孢杆菌3种试验菌 的敏感性检测肉中抗生素残留的生物简易系统检查 法,此法能够确定抗生素种类,提高了准确率和检出 率,对氨苄青霉素类检测量为25gg/kg. 2.1.2TTC法TTC即氧化三苯基四氮唑 (tripheyetetrazoliumchloride),此法最早由Neel 和Calbert在1955年提出.其原理是在牛奶中加入 菌种(如嗜热乳酸链球菌)进行培养,如牛奶中无抗 生素,则菌种增殖,加入TTC指示剂后发生反应, TC还原为红色,如有抗生素