同时检测多种食源性病菌的寡核苷酸芯片Development.docVIP

PAGE \* MERGEFORMAT - 8 - 同时检测多种食源性致病菌的寡核苷酸芯片=Development of an oligonucleotide-based microarray to detect multiple foodborne pathogens [关键词] 食源性致病菌；芯片；多重PCR；检测 研究开发设计了针对大肠杆菌O157：H7、沙门氏菌、单增李斯特菌等病原体的特异的70-mer探针应用于开发的病原体检测芯片。为了降低检测成本，每个芯片的晶片都设计制作为可容纳同时分析12个不同样本的12组成分。为了达到较高的检测灵敏度和特异性，在芯片分析前先进行特异的DNA片段扩增而不是全基因组的随机扩增。在含有靶序列的14种PCR扩增片段，芯片能高效的区分这4个病原体，且检测灵敏度为 10-4ng的基因组DNA。应用该法对39个鲜肉样本检测，发现16个样本被1-2种病原体污染。在同一样本中可同时检测到沙门氏菌和大肠杆菌O157：H7，沙门氏菌和单增李斯特菌。总的来说，芯片分析结合多重PCR检测方法能够有效地检测食物样本中的单个或多个病原菌，同时结合病原菌毒力提供了重要的基因型信息。(Molecular and Cellular Probes，24：77–86，2010) 实时PCR技术为基础的微流控阵列芯片同时检测多种水源性病原菌=Real-time PC