动物细胞工程三 单克隆抗体的制备.docVIP

第三节 动物细胞工程（二） 编制：李绒 审 核：李绒 审 批________ . 班 组 姓名 组评 师评________ 【学习目标】 1、掌握动物细胞融合的原理、方法过程和意义。 2、掌握制备单克隆抗体的方法、过程和应用。 【使用说明】1、认真阅读教材P57-P59的知识完成自主学习和自学效果检测内容。 2、合作探究时先自己思考一定时间，再在组长的组织下交流讨论。 【重点难点】 重点：1．动物细胞融合的原理、过程和意义。2．单克隆抗体制备的过程的步骤和应用。 难点：1．单克隆抗体制备的过程。2．动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较。 【自主学习】 1、细胞融合是指在一定条件下将________或________细胞融合为________细胞的过程。科学研究表明，　不同类型的动物细胞之间能进行融合，形成________，如鼠一鸡、鼠一猴杂种细胞等。 2、要促进细胞融合，采取的方法主要有________（如________）、________（如用________作为诱导剂）和________（如用________作为诱导剂）。目前物理法融合效率较高，且对________，易________、________和________，在实验室被广泛使用。动物细胞融合技术的最重要的用途是制备________。 3、实验室制备单克隆抗体可从________和________获得。工业化制备单克隆抗体一般通过________获得。开发治疗________的抗体是单克隆抗体研究最活跃的领域之一。 4、制备单克隆抗体时选择的两个亲本细胞分别是什么？请说明理由。 分析：制备单克隆抗体时选择的两个亲本细胞分别是小鼠的_________和____________，这是因为单个B淋巴细胞具有___________________的优点，但是不能无限增殖；而体外培养的肿瘤细胞（如骨髓瘤细胞）具有______________的优点。 5.基本过程： （1）给小鼠注射 。 （2）取出小鼠的脾脏，分离出________，将之与体外培养的________细胞融在____________或PEG的诱导下融合。 （3）筛选出既可以 ，又可以 的杂交瘤细胞，将之在培养基上进行克隆。 （4）单克隆抗体的提取：既可以从 中提取，称为体外培养获得；也可以将特　定的杂交瘤细胞注射到小鼠体内，然后再从小鼠 中提取，称体内获得。 分析：给小鼠注射特定的抗原蛋白是为了使小鼠获得相应的免疫反应，从而获得相应的效应B淋巴细胞；诱导动物细胞融合以后，在相应的培养基上至少存在5种类型的细胞，即：杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞自融的细胞、B淋巴细胞以及B淋巴细胞自融的细胞。因此，要对融合后的细胞进行筛选。 6.单克隆抗体的优点：具有_______、_______、_______、_______、_______________________的优点。 7．单克隆抗体的应用： （1）作为诊断试剂（2）用于治疗疾病和运载药物 【自学效果检测】 1、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是（ ） ①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．①②③④ B．①③⑤ C．②④ D．①③ 2、下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答： 　 （1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得_____________细胞，该细胞能够产生________。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射________类物质。 （2）B过程是一个_______过程，该过程的进行需要灭活的____或__ 的诱导。 （3）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是________。 【合作探究】 1、用文字和箭头表示出单克隆抗体的制备过程。 2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较 动物细胞融合 植物体细胞杂交 原理 融合前的处理 诱导方法 用途 【课堂检测】 A级题：创新设计P51选择题4、5、6 B级题： P52选择题9、10 P53填空15题 　 你认为自己是什么样的人，