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PKC和HSP70表达在缺血预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用 作者：刘少青沈秀萍迟玉友尹洪山李刚苏庆国 【摘要】目的探讨蛋白激酶C(PKC)和热休克蛋白70(HSP70)在缺血预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的保护作用。方法将大鼠随机分为对照组(CON)、缺血再灌注组(IR)和缺血预处理后缺血再灌注组(IPC)。除病理组织学变化外，用免疫组化检测各组中不同灌注时间的PKC和HSP70的变化。结果病理组织学肾小管评分IPC组均低于IR组(P＜005)，而IPC组和CON组之间无显著性差异(P＞005)；PKC的表达IPC组明显高于IR组(P＜001)，并且在再灌注2h和6h时，IPC组中的表达明显高于CON组(P＜005)；HSP70的表达IPC组明显高于IR组(P＜001)，并且在再灌注2h和6h时，在IPC组中的表达明显高于CON组(P＜001)。结论缺血预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤有保护作用，其保护机制可能与PKC的激活以及与HSP70的诱导合成增多有关。 【关键词】肾脏；缺血预处理；缺血再灌注损伤；蛋白激酶C；热休克蛋白 　　【Ａbstract】ＯbjectiveToinvestigatetheroleofproteinkinaseCandHSP70intheprotecitveeffectofischemicpreconditioninginratrenaldamageofischemiareperfusion.ＭethodsRatswererandomlydividedintocontrolgroup(CON),ischemiareperfusiongroup(IP)andischemicpreconditioninggroup(IPC).Indifferentgroups,desidespathologicalchanges,theproteinexpressionofproteinkinaseC(PKC)andHSP70weremeasuredbyimmunohistochemistry.ＲesultsThescoreofrenaltubulesinIPCwaslowerthanthatinIR(P＜005)，andthescorewassimilarbetweenIPCandCON(P＞005)．TheproteinexpressionofPKCinIPCwashigherthanthatinIR(P＜001)，andreperfusedfor2hor6h，theexpressionofHSP70inIPCwashigherthanthatinIRrespectively(P＜001)，andreperfusedfor2hor6h,theexpressionofHSP70inIPCwashigherthanthatinCON(P＜001)．ＣonclusionIschemicpreconditioningcouldprotectthedamageofischemiareperfusionandthemechanismmayberelatedtotheactivationofPKC,andmayberelatedtomoreformationofHSP70. 　　【Keywords】renalischemiareperfusioninjury,ischemicpreconditioning,proteinkinaseC,heatshockprotein 　　自1986年Murry等［１］提出缺血预处理对心脏有保护作用以后，人们开始了通过各种预处理来调动脏器内源性保护作用的研究。最后，国内、外有人在这方面开始了对肾脏的观察，但对其机制未做进一步的报道。本研究的目的是通过免疫组化检测PKC和HSP70的变化，以及通过病理组织学变化来进一步证实缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤有保护作用，并探讨其可能存在的机制。 　　1材料与方法 　　１．１实验动物健康成年Wistar大鼠81只，购自延边大学医学院实验动物科，体重(23728±166)g，雌雄不限。 　　１．２实验方法 　　1．２．１将大鼠随机分为对照组(CON)、缺血再灌注组(IR)、缺血预处理后缺血再灌注组(IPC)，每组27只，每组再分为3个小组，每小组9只。IPC组连续3次缺血5min后再灌注5min，再缺血1h，然后再灌注0、２、6h取标本；对照组在游离出左肾蒂后，未做任何处理，但在切取左肾标本时要在时间上保持和IPC组相同。切取标本后，用中性福尔马林固定，制成石蜡切片，以备免疫组化和普通常规染色用。 　　1．２．２组织中PKC蛋白的检测：采用免疫组化(SABC)染色方法。PKC和HSP70抗体