嗜酸,血小板计数.pptVIP

临床检验学实验课 临床检验学教研室 2011年3月 实验内容 1.毛细血管采血# 2.血小板计数(Platelet count)# 3.嗜酸性粒细胞直接计数 (Eosinophil count, EC)# 实验要求 1、 掌握毛细血管采血的方法，了解不同采血部位对检验结果的影响； 2、 掌握PLT计数，E直接计数的原理、方法、 参考范围、注意事项. 毛细血管采血 原理： 采血针刺破皮肤毛细血管后使血液自然流出，用一次性的微量吸管吸取血液。 毛细血管采血 操作： 血小板计数 原理： 血液经稀释液按一定比例稀释和破坏RBC后，充入血细胞计数盘内，在显微镜下计数一定范围内的PLT数量，经过换算求出每升血液中PLT的数量。 　 器材、试剂、标本 [器材] 显微镜、血细胞计数盘、采血针、Ｈb吸管、 小试管等。 [试剂] 10g/L草酸铵稀释液 (草酸铵，EDTA-Ｎa2 ） [标本] 末梢血 操作步骤 计算和报告 计算公式： 　PLT/L=5个中方格内PLT数（N）×109/L PLT/L=N×5×10×20×106 /L 报告方式： PLT:XXX ×109/L 注意事项 1、实验器材必须清洁 2、针刺深度应达3mm 3 、适度混匀 4、充池后应静置15min 5、计数应在1h内完成，否则结果偏低 6、光线不要太强 7 、如成簇分布需重新计数 临床意义 1. 参考值 :（100～300 ）×109/L 2. 病理变化的临床意义： PLT增多:原发性的血小板增多症 急性大出血 脾切除 PLT减少:再生障碍性贫血 原发性血小板紫癜 弥漫性血管内凝血 脾肿大# 嗜酸性粒细胞直接计数 原理： 用嗜酸性粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏红细胞和大部分其他白细胞，并使嗜酸性粒细胞着色。将悬液滴入计数池，计数一定范围内的嗜酸性粒细胞数，经换算得出每升血液中的嗜酸性粒细胞总数。 器材、试剂、标本 [器材] 显微镜、血细胞计数盘、采血针、Ｈb吸管、小试管等. [试剂] 伊红--丙酮稀释液 [标本] 末梢血 操作步骤 计数区域 计算和报告 计算公式 E/L= 报告方式 E： X.XX ×109/L 注意事项 1.时间 ：固定采血时间，排除日间生理变化；操作应在30～60min内计数完毕，否则E逐渐被破坏或不易辩认，使结果偏低。 2.混匀：E在稀释液中易发生聚集，要及时混匀。E易于破碎，振荡不宜太猛烈。 3.注意与中性粒细胞区别，中性粒细胞一般不着色或着浅红色，且颗粒较小。 临床意义 1. 参考值 :（0.05~0.3） ×109/L 2. 病理变化的临床意义： E增多：寄生虫病 变态反应性疾病 皮肤病（湿疹，银屑病等） E减少：长期应用肾上腺皮质激素、 急性传染病（伤寒极期） * * 拭血 准备 按摩 消毒 针刺 收血 采血针、微量吸管、EPP管 75℅乙醇、无菌干棉球 注 意 事 项 1. 采血部位的选择： 正常人：皮肤完整，无烧伤、冻疮、发绀、 水肿、炎症； 半岁以下婴幼儿：拇指、脚趾或足跟内、外 侧缘采血； 烧伤患者：皮肤完整处。 注 意 事 项 2. 严格无菌技术操作，防止采血部位感 染；做到一人一针一管，避免交叉感染。 3. 皮肤消毒后，待乙醇干后采血。 4. 取血时可稍加挤压，但切勿用力挤压. 5. 进行多项检查时采血的顺序依次为： PLT, RBC,HB,WBC。 方法学评价 手指血 耳垂血 优点 操作方便 一次可获较多血样结果稳定 痛感较轻 操作方便 适用于反复采集 缺点 较痛 与静脉血仍存在着某些差异 血循环差，血液容易停滞导致RBC、 HB、 HCT结果均比静脉血高 受气温影响较大，特别是冬天，波动较大,结果不够恒定 吸取草酸铵 稀释液0.38ml 准确采血20ul， 加入稀释液中 室温静置10min 充池、静置15min 高倍镜下计 数 　计 　算 正面观 侧面观 计 数 池 支柱 支柱 盖片 血细胞计数盘（改良牛鲍计数盘）