实验1 概述+2pcr+3基因组+4检测.pptVIP

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  • 2018-06-27 发布于浙江
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实验1概述2pcr3基因组4检测

* 3、PCR扩增产物的检测 取10μl产物进行电泳检测(操作步骤:实验4) 1: DNA Marker DL2,000 2~5: PCR扩增产物(500bp片段) 本实验的预期结果: PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 2000 1000 750 500 200 100 1 2 3 4 5 实验报告 (做完实验4后完成) 记录PCR扩增DNA以及DNA Marker的电泳图谱,说明带型含义(对结果和出现的问题进行分析,如若未获得单一的扩增带,这是什么原因造成的?扩增带颜色深浅说明什么等) 必做课外思考题: 一位同学从拟南芥中提取了RNA并在体外逆转录获得了cDNA。他打算以该cDNA为模板,从中将下列基因的编码区序列(红色字体部分,长561bp)通过PCR反应扩增出来。已知cDNA模板的浓度为0.5μg/μl,引物母液浓度为10 μM,Taq DNA聚合酶母液浓度为 5 U/μl,PCR 缓冲液为 10×浓度的母液. 请帮助他(1)设计合适的引物,(2)建立适当的反应体系和(3)扩增程序以扩增红色部分的序列。 CGAGAAAAGG AAAAAAAAAA ATAGAAAGAG AAAACGCTTA GTATCTCCGG CGACTTGAAC CCAAACCTGA GGATCAAATT AGGGCACAAA GCCCTCTCGGAGAGAAGC

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