三叶香茶菜保肝活性部位筛选及抗大鼠肝纤维化的实验研究-药理学专业论文.docxVIP

中英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称ALBalbumin白蛋白ALT/GPTAlanineaminotrrasferease/glutamic-pyruvictransaminaseAST/GOTAspartateaminotransferase/glutamic-oxaloacetictransaminase谷丙转氨酶谷草转氨酶BPDBiopholyldicarboxylate联苯双酯CCl4Carbontetrachloride四氯化碳ColchicineColchicine秋水仙碱ECMExtracellularmatrix细胞外基质GSH-PxGlutathioneperoxidase谷胱甘肽过氧化物酶HAhyaluronicacid透明质酸HBVHepatitisBvirus乙型肝炎病毒HBs-AgHepatitisBsurfaceantigen乙型肝炎表面抗原HFhepaticfibrosis肝纤维化HITHerbaisodonisterifoliae三叶香茶菜HSChepaticstellatecell肝星状细胞Hyphykroxyproline羟脯氨酸igIntragastricadministration灌胃ipIntraperitionealinjection腹腔注射MDAmalondiadehyde丙二醛MMP-2matrixmetaloproteinase-2基质金属蛋白酶-2NSsodiumchlorideinjction氯化钠注射液ODopticaldensity光密度值PBSphosphatebuffersolution磷酸盐缓冲液PCIIITypeIIIproeollagenIII三型前胶原TGF-β1TransforminggrowthFactor-β1转化生长因子-β1TIMP-1tissueinhibitorofmetalloproteinase-1金属蛋白酶组织抑制因子-1TMBTetramethylbenzidine四甲基联苯胺TPTotalProtein总蛋白T-SODTogethersupernotransferase总超氧化物岐化酶中文摘要目的：初步筛选三叶香茶菜(Herbaisodonisternifoliae)保肝作用的活性部位，并研究其抗大鼠肝纤维化的作用以及作用机制。方法：1、三叶香茶菜药材水提醇沉浓缩液经成分预试实验后，用聚酰胺柱色谱分离，两个主要分离部位做总黄酮和总皂苷含量测定；用95%乙醇提取三叶香茶菜；水提取三叶香茶菜，正丁醇萃取；观察各个提取分离部位对CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT活力的影响。2、将96只Wistar雄性大鼠按随机原则分为6组。正常组除外，其余各组均给予背部皮下注射40%CCl4，按照0.3ml/100g，每周注射两次，同时给予三叶香茶菜提取物或生理盐水灌胃，共8周。8周后，将其余大鼠全部处死，称量肝脏湿重，分离血清，检测各组大鼠血清ALT、AST活力；ELISA法检测血清HA、PCIII水平；固定肝组织，观察肝组织病理学:HE染色和Masson染色。3、检测各组大鼠肝组织匀浆SOD、GSH-Px活性，以及MDA含量。ELISA法检测各组大鼠肝组织匀浆TGF-β1；ELISA法检测各组大鼠血清MMP-2及TIMP-1含量；TUNEL法检测肝细胞的调亡情况。结果：1、三叶香茶菜水提醇沉液中可能含有糖、多糖、皂苷、有机酸、黄酮类、甾体、三萜类等化学成分；B部位总黄酮的含量约占1.14%，总皂苷约占1.12%；C部位总黄酮约占15.90%，总皂苷约占0.008%；三叶香茶菜水提醇沉液显著降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清中ALT活力（P0.05或P0.01）；B、C、D、E、F部位对CCl4致急性肝损伤小鼠血清中ALT活力无显著降低作用(P0.05)。2、实验数据经统计学处理后显示:三叶香茶菜高、中剂量显著降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST含量，升高ALB；三叶香茶菜三个剂量均能显著降低肝纤维化大鼠血清HA和PCIII的含量（P0.05或P0.01）;三叶香茶菜高、中剂量显著降低HyP含量（P0.05或P0.01）。3、实验数据经统计学处理后显示：三叶香茶菜高、中剂量能显著降低大鼠肝组织匀浆TGF-β1的含量，能显著提高SOD和GSH-Px活性，降低MDA含量（P0.05或P0.01）。三叶香茶菜高、中剂量能显著降低各组大鼠血清TIMP-1的含量,显著提高MMP-2的含量（P0.05或P0.01）。光镜下观察到调亡细胞为棕黄色，正常组很少出现调亡细胞，模型组调亡细胞较多，与模型组相比，秋水仙碱组和三叶香茶菜剂量组调亡细胞相对较少。结论：三叶香茶菜水提醇沉液具有一定的保护CCl4小鼠急性肝损伤和抗CCl4诱导的大鼠肝纤维化的作用。关键词：三叶香茶菜；