Caco-细胞单层模型的建立与验证.docVIP

Caco-2细胞单层模型的建立与验证 Caco-2细胞单层模型的建立与验证 荆,敏捷,盛星,胡一桥(南京大学医药生物技术国家重点实验室,南京210093) 摘要:目的研究建立Caeo-2细胞模型的方法,并确认Caeo-2细胞模型的正常生长特性,以在日常培养中进行监控.方法 常规培养条件下,Caeo-2细胞以每lmL含8X104个的接种密度接种于Millieell插入式培养皿中,培养21d后用光镜,电镜,细 胞密度测定等方法检查细胞的形态学及生长特点,测定碱性磷酸酶活性,跨膜电阻,荧光素钠透过量以检验细胞单层的极化 现象和致密程度.结果Caeo-2细胞单层在生长10d以后均匀,致密,21d后微绒毛,碱性磷酸酶,紧密连接等呈不对称分布, 跨膜电阻达到600Q-cm2,荧光素钠透过量为4.16Pg?h-em一,而同样条件下空白膜的透过量大于240pg?h一?cm-.:结论 本培养条件下,Caeo-2细胞单层形态与小肠上皮细胞类似,跨膜电阻,标志物透过量均达到要求,可以作为研究小肠药物转 运过程的体外模型. 关键词:Caeo-2细胞;转运;跨膜电阻;渗透性 中图分类号:Q81l文献标识码:A文章编号:1001—2494(2006)18—1431—04 EstablishmentandValidationofCaco-2CellLinesforLntestinalEpithelialPeme