S100A4和VEGFC表达与胃癌淋巴转移关系.docVIP

S100A4和VEGFC的表达与胃癌淋巴转移的关系 【摘要】 目的：观察S100A4和血管内皮生长因子C（VEGFC）在胃癌组织中的表达，分析其与肿瘤淋巴转移的关系以及二者的相关性. 方法: 采用免疫组化方法检测S100A4和VEGFC在76例胃癌及24例癌周正常组织中的表达. 结果: S100A4和VEGFC在胃癌组织中的阳性表达率明显高于癌周正常组织（P＜0.01）. S100A4的表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关（P＜0.01或P＜0.05）；VEGFC的表达与肿瘤浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有关（P＜0.01或P＜0.05）. S100A4和VEGFC的表达呈正相关（rs＝0.334，P=0.003），kappa系数为0.298. 结论： S100A4可能参与VEGFC淋巴管生成通路，在胃癌的淋巴转移中发挥重要作用. 【关键词】 胃肿瘤 内皮生长因子 钙结合蛋白质类 淋巴转移 　　0引言 　　胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，早期即可发生淋巴转移. 大量研究证明，是否有淋巴结转移是胃癌患者重要的预后因素［1-3］. 血管内皮生长因子C（VEGFC）是目前发现的首要的淋巴管内皮细胞调节因子，可诱导实体瘤内或瘤周的淋巴管生成，与恶性肿瘤的淋巴转移密切相关［4-5］. S100A4是钙离子结合蛋白S100家族的成员之一，近年研究发现S100A4在多种恶性肿瘤组织中表达，其表达与肿瘤分期和淋巴结转移有关，被认为是一种肿瘤转移促进基因［6-7］. VEGFC和S100A4在肿瘤组织中的关系还不清楚. 我们运用免疫组化方法检测VEGFC和S100A4在胃癌组织中的表达，分析其与肿瘤淋巴转移的关系以及二者之间的相关性. 　　1对象和方法 　　1.1对象 　　76（男46，女30）例胃癌石蜡包埋组织标本取自泰山医学院附属医院病理科，均为外科手术切除标本，患者术前未作放、化疗. 所有组织均经临床及病理组织学检查确诊. 患者年龄40~76岁，中位年龄56岁，其中有淋巴结转移者43例，无淋巴结转移者33例. 选择24（男14，女10）例癌周正常组织作为对照，年龄35~70岁，中位年龄54岁. 兔抗人S100A4多克隆抗体为Neo Marker公司产品，羊抗人VEGFC单克隆抗体为Santa Cruz公司产品. SP免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒购自北京中山生物技术有限公司. 　　1.2方法 　　采用免疫组织化学SP法进行染色，实验步骤按试剂盒说明书进行. 采用EDTA缓冲液微波修复抗原，DAB显色. 用PBS代替一抗作为阴性对照. S100A4和VEGFC阳性染色为淡黄色、棕黄色或棕褐色，定位于细胞质. 采用二级计分法，首先按染色强度评分：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；然后按阳性细胞率评分：肿瘤细胞内无阳性染色者为0分，阳性细胞率≤10％为1分，11％~50％为2分，51％~75％为3分，＞75％为4分. 两者乘积≤2分为免疫组化反应阴性，≥3分为阳性. 　　统计学处理：采用SPSS12.0统计软件进行χ2检验. 　　2结果 　　2.1S100A4和VEGFC在胃癌组织和癌周正常组织中的表达S100A4和VEGFC免疫反应阳性物质均位于胃癌细胞的细胞质内，呈棕黄色或棕褐色颗粒状（图1，2）. S100A4在胃癌组织中表达阳性率为65.8%（50/76），在癌周正常组织中表达阳性率为16.7%（4/24）；胃癌组织中VEGFC表达阳性率为42.1%（32/76），而癌周正常组织中未见VEGFC免疫反应阳性信号. 胃癌组织中S100A4和VEGFC的表达阳性率明显高于癌周正常组织（P﹤0.01）. 　　2.2胃癌组织中S100A4和VEGFC的表达与临床病理因素的关系胃癌组织中S100A4的表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关（Plt;0.01或Plt;0.05），与患者年龄、肿瘤大小和浸润深度无关（Pgt;0.05，表1）. VEGFC的表达与胃癌组织TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有关（Plt;0.01或Plt;0.05），与患者年龄、肿瘤大小和分化程度无关（Pgt;0.05，表1）.表1胃癌组织中S100A4和VEGFC的表达与临床病理因素的关系（略） 　　2.3胃癌组织中S100A4和VEGFC表达的关系在27例胃癌组织中S100A4和VEGFC均被检测到，23例只检测到S100A4，5例只检测到VEGFC，有21例癌组织中二者均未检出. S100A4和VEGFC的表达呈正相关关系（rs＝0.334，P=0.003），kappa系数为0.298. 　　3讨论 　　VEGFC是VEGF家族的新成员，它通过与主要表达于淋巴管内皮细胞的VE