贝加因、恩替韦和三苯氧胺与蛋白质、DNA相互作用的电化学研讨.pdfVIP

摘要 药物分子与生物大分子的相互作用的研究，是生命科学研究的热门课题。在诸多用 于研究药物分子与生物大分子相互作用的方法中，电化学方法具有快速灵敏、操作简单 等优点，能获取其相互作用机理的相关信息。本文以伏安法和零流电位法为研究手段， 分别以天贝加因、恩替卡韦和三苯氧胺为药物小分子物质研究对象，研究了它们与DNA 或蛋白质的相互作用，具体研究结果分述如下： 1对类黄酮化合物贝加因(BA)的氧化机理及其与人血清白蛋白(HSA)的相互作 3．3的BR缓冲溶液中，贝加因A环上6，7-OH首先在较 用做了研究。研究表明，在pH 低电位0．35V下经过一个两电子转移过程，形成邻二苯醌衍生物。此氧化过程中还伴随 有一个中间态自由基生成的过程。所形成邻二苯醌衍生物一部分在较高电位0．71V下经 过一个两电子转移过程形成醌的衍生物，另一部分在电位O．32V下发生还原反应生成 109 HSA·B‰。实验测得HSA与BA的结合比腕为2，表观结合常数∥为(3．264-0．15)x (tool·L．1)‘2(P=0．90) 2采用循环伏安法和示差脉冲伏安法在碳糊电极(CPE)和DNA修饰碳糊电极 3．3)缓冲溶液中， (DNA／CPE)上考察了BA和小牛胸腺dsDNA的相互作用。在BR(pH 当BA与溶液中或电极表面的DNA反应后，BA的氧化峰电位均正移，峰电流都减小。 研究表明，BA与DNA的碱基对以嵌插方式结合，形成结合比为1：1的配合物DNA·BA， 流随BA浓度的增大而增大，由于BA分子的嵌入和BA中间态氧化产物BA半醌自由 基的产生破坏了DNA分子的双螺旋结构。而且，DNA／CPE上鸟嘌呤的氧化峰电流与 信息。 V(vs．SCE)处出现一 用。在HAc-NaAc(pH4．4)缓冲溶液中，ETV在碳糊电极上于1．1 氧化峰。加入BSA之后，其峰电流明显下降，峰电位基本不发生移动。实验结果表明， ETv与BSA形成了非电活性的配合物。根据加入BSA前后，E，Ⅳ氧化峰电流的降低值 4提出了一种研究DNA与小分子物质相互作用的新方法一零流电位法，并推导了 相关公式。在BR(pH DNA与天然抗氧化剂贝加因(BA)的相互作用，测得了结合反应的热力学及反应动力 学常数。根据DNA与BA结合反应所引起的DNA／CP在BR(pIl3．3)缓冲液中的零流电 L·tool～、结 位移动，求得的DNA与BA的结合比为1：1和表观结合常数∥为7．58×107 x1010L·tool～、 作用，求得受损DNAox与BA的结合比m为1：1和表观结合常数夕为4．92 结合反应的表观结合速率常数毛为4．29x103(tool·Lq)q．s～。 5在PBS(pn7．O)缓冲溶液中，考察了三苯氧胺(TAM)和DNA的伏安行为，结果 表明，TAM与DNA的氧化峰互相重叠，用伏安法难以研究TAM与DNA的相互作用。 将DNA固定在碳浆(carbon 7．0) 缓冲溶液中的零流电位随TAM浓度的变化而发生移动。基于此，用零流电位法研究了 2．55×108I，．tool～。 关键词：贝加因，恩替卡韦，三苯氧胺，血清白蛋白，小牛胸腺dsDNA，伏安法，电 位法 n Abstract The the on interactionof moleculeswithsmall moleculeswas study biological