采用cytotraprxr酵母双杂交系统筛选两种人精子蛋白结合物的初步研究-preliminary study on screening two human sperm protein conjugates by cytotraprxr yeast two-hybrid system.docxVIP

中国协和医科大学 中国协和医科大学 中文摘要 中文摘要 生殖与发育是生命科学研究的重要课题。哺乳动物的精子 发生是一个十分复杂但又高度有序的细胞分化过程，相关基因 的转录及表达，严格受时间、空间调控。因此寻找和研究不同 发育阶段的差异表达的基因，将有助于最终阐明精子发生的机 理，并为控制生育和不育机理的探索提供新的线索。 本课题组曾从人睾丸eDNA文库得到一个新的全长eDNA，命 名为HSD-4。HSD一4eDNA序列全长2497bp，含一个738bp的完 整阅读框，编码245个氨基酸，分子量为28．2KD。GenBank登 录号为AFl 62680。通过氨基酸序列分析发现在HSD-4编码蛋白 的氨基端有一个典型的RING finger结构域，而在羧基端上游 有一个锌指结构域。根据近两年来的文献报道，RING finger 结构域可能具有泛素连接酶E。的活性。 在本实验中，为进一步研究HSD一4表达产物的功能，我们将 HSD-4编码的245个氨基酸作为“诱饵蛋白”，利用CytoTrap。XR 酵母双杂交系统筛选与之相互作用的蛋白质。近年来的研究表 明，RING finger结构域能够特异地与泛素偶联酶E。结合。因 此我们推测人类泛素偶联酶(E。)Ube可能是HSD一4蛋白的结合 物之一，并且通过CytoTrap。XR酵母双杂交系统对二者的相互 作用进行了验证，但二者相互作用没有获