苯嗪草酮在大鼠体内毒物动力学分析-toxicokinetics analysis of buprofezin in rats.docxVIP

缩略词（Abbreviation）HPLC GC RPC NPCUVDhigh performance liquid chromatography gas chromatographyreverse phase chromatography normal phase chromatographyultraviolet-visible detector高效液相色谱法气相色谱法 反相色谱法 正相色谱法紫外-可见光检测器FDfluorescence detector荧光检测器EDelectrochemical detector电化学检测器CANacetonitrile乙腈EAethylacetate乙酸乙酯Kaabsorption rate constant吸收速率常数Keelimination rate constant消除速率常数t1/2Kaabsorption half-life吸收半衰期t1/2Keelimination half-life消除半衰期AUCarea under concentration-time curve药时曲线下面积Vdapparent volume of distribution表观分布容积CLclearance清除率Tetargeting efficiency靶向效率系数I苯嗪草酮在大鼠体内毒物动力学研究硕士研究生：张康指 导 老 师 ： 李龙 副教授中文摘要苯嗪草酮，商品名为 Goltix，化学名为 4-氨基-3-甲基-6-苯基 1,2,4 三嗪-5 酮，是 1975 年联邦德国的拜耳(bayer)公司研制推广开发的低毒、低残留除草剂 新品种。苯嗪草酮主要通过植物根部吸收，再输送到叶子内，通过抑制光合作用 的希尔反应而起到杀草的作用。作为我国应用新型的除草剂之一，应用非常广泛。 苯嗪草酮在土壤中的光解作用得到证实，在水中光解后产生氨基的脱氨基作用也 被证实。但是目前国内外对苯嗪草酮的在动物体内的毒物动力学方面和药理学方 面研究鲜有报道。所以阐明其在动物机体内的代谢过程有着非常重要的意义。本 实验研究目的是通过动物模型研究分析苯嗪草酮在体内的生物转运过程。重点探 讨了苯嗪草酮在大鼠体内的毒物动力学规律、组织分布及排泄情况，为进一步进 行毒作用及机制研究奠定基础。第一部分 苯嗪草酮高效液相色谱分析方法建立 目的：建立苯嗪草酮原药的高效液相色谱检测方法，对检测条件进行优化，并对 建立的检测方法进行评估。 方法：分别改变紫外检测波长，流动相配比，柱温及流速对苯嗪草酮同一浓度标 准溶液进行检测，建立并优化苯嗪草酮高效液相色谱检测方法；配置苯嗪草酮原 药系列标准溶液浓度，通过建立的检测方法进行检测，得出标准曲线，分析相关 性；以空白血清为例，配置高、中、低三种浓度标准溶液，对建立方法的回收率， 日间日内精密度，样品常温下及冻融稳定性进行评估。结果：经优化后 HPLC 检测苯嗪草酮原药条件为：色谱柱：150mm×4.6mm(i.d) 不锈钢柱，内填 μBondaparkC18，粒径：5μm；流动相：乙腈：水=1:1；流速： 0.5mL/min；柱温为 25°C；检测波长：306mm；进样量：20μl。 苯嗪草酮出峰时间为 4.36min；标准曲线线性相关 R2=0.9999，最低检出限为II0.2μg/ml，不同浓度平均回收率均在 95.3%～105.20%之间，日内精密度均小于4.63%，日间精密度小于 5.52%，常温下放置 12 小时稳定性 RSD%均小于 1.29% ，-20℃冷冻 10 天溶解后稳定性 RSD%均小于 0.89%。 结论：建立的苯嗪草酮原药 HPLC 检测方法适用于对苯嗪草酮样本的检测。第二部分 苯嗪草酮血药浓度随时间变化及毒代动力学参数研究 目的：观察苯嗪草酮在大鼠血清中的浓度随时间的变化，并求出主要血药动力学 参数。方法：随机选取健康成年雌雄大鼠各 4 只，雄性组染毒剂量为 2000mg/kg，雌性 组染毒剂量 1360mg/kg，采用灌胃方式染毒，灌胃容量为 0.5ml/100g，并于染毒 后 5、15、30min 和 1、2、4、8、12、24h 采血，分离血清，经乙腈提取处理后， 采用高效液相色谱法检测血清中苯嗪草酮的浓度，DAS3.0 软件计算毒代动力学 参数。结果：雌雄大鼠于染毒 5min 后均检测到苯嗪草酮，血毒浓度均符合一级吸收一 室模型， 雄性 毒动 学方程为 C=8.79（e-0.39t-e-1.04t ），雌性大 鼠 毒动学 方 程 为 C=4.96(e-0.13t-e-2.01t)。雄性大鼠在染毒后血毒浓度达峰时间是 Tmax=2h，达峰浓 度为 Cmax=65.96mg/L ，雌性大鼠达峰时间是 Tmax=3.5h ，达峰浓度时为 Cmax=40mg/L，雌