核苷类抗HI系列前药的化学稳定性及药物动力学研讨.pdf

摘要 摘要 艾滋病是严重危害人类健康的全球性传染病。目前，医学界至今仍未成功研 究出可以彻底治疗AIDS的方法。核苷逆转录酶抑制剂(NI玎Is)一直是主导的 抗AIDS药物，研究发展迅速。但NRTIs类药物的临床应用和药代动力学都有一 定的缺陷，如d4T、AZT有临床毒性，在血浆中半衰期短(1小时)，代谢差， 易产生耐药性等。磷酸酯核苷类前药是近年核苷类药物结构修饰的一个重要方 向。尽管在前药设计和合成方面有了很大的成功，但是验证前药机理的核苷释放 问题仍然很少有过系统的研究。因此，本论文针对体外活性测试成功的前药，通 过药物代谢动力学的研究来考察其能否在体内顺利地实现改善核苷利用的目的。 本论文创新性地结合有机化学基础，分析化学手段，和临床前药物动物体内 动力学研究，对具有优秀体外活性的化合物进行系统的筛选和评价，取得了以下 的研究结果： 1． 对在体外抗病毒实验中显示了很高的抗HIV病毒活性(其抗HIV的 NMR， HPLC／MS，ESI．MSn等综合手段进行体外化学稳定性研究，和水解 代谢产物分析。论文发现d4T-D．E在不含酶的水溶液环境中，弱酸性 环境有利于该化合物的化学稳定性，但酸性过大，也会加速它的水 解；中性条件下有一定的半衰期(12．5小时)；碱性环境立即分解。 在水解时，主要有三种可能的代谢途径。第一种为先水解断裂D，然 后水解释放出核苷；第二种为直接水解释放出核苷；第三种，d4T-D．E 被氧化，然后先水解断裂D，代谢为核苷d4T；或直接释放出核苷。 2． 论文初次建立了～种快速、灵敏的测定小鼠血浆中d4T，d4T-D—E浓 度的液质连用定量方法(HPLC／Ms／MSMRM法)。经过灵敏度，检 测限，精密度和准确度，特异性，基质效应，稳定性确证，应用于 d4T-D．E在小鼠体内动力学初步研究。 3． 论文通过对d4T-D．E的小鼠体内药物代谢动力学初步研究发现，灌 胃给药d4T-D．E进入体内后，很快即代谢为d4T。这与d4■D．E结构无 法耐受体内的磷酸酯酶有很大关系，容易被磷酸酯酶催化分解为 摘要 d4T和含磷组分。比较其主要药动学参数，相对于直接给药的d4T， d4T-D．E的消除相tl／2较短，相对口服生物利用度为40．31％，没有显示 比未改造的核苷d4T更好的药动学性质。因此，该体外活性显著的药 物由于不良的体内药动学结果而缺乏进一步临床开发的潜力。 4． 本论文采用一锅法合成了分别带有吸电子和推电子基团的六个 AZT-5’．含磷衍生物。 5． 本论文初次建立了一种简单、快速、灵敏定量检测大鼠血浆中AZT-5’． 含磷系列衍生物的HPLC．ESI．MS／MSMRM方法。对该方法进行灵敏 度，检测限，精密度和准确度，特异性，基质效应，稳定性确证。 将此法应用于该系列AZT-5’一含磷衍生物的动力学实验。 6． 本论文首次通过大鼠药物动力学实验，研究不同取代基系列化合物 在体内的构效关系规律。发现不同取代基对AZT-5’．含磷衍生物的体 内动力学有不同影响，吸电子和推电子基团的强弱是主导因素，或 与相应酚的pKa大小有着直接的联系。吸电子基团衍生物在体内血 浆中检测不到原药，代谢得到的AZT浓度较高。推电子基团衍生物 在体内血浆中有一定的稳定性，能随着原药在体内的动力学运转变 化，缓慢释放AZT，因此同时检测到原药和代谢物AZT。Y基供电 子效应越强，化合物越稳定，在体内释放的AZT越持久，缓释的效 果越好。 7． 本论文首次发现改造