幻灯片1 - 顺德第一人民医院科教科.ppt

方式：半保留复制(semi-conservative replication) 方向：双向复制(bidirectional replication) 特点：半不连续复制(semi-discontinuous replication) 高保真性(high fidelity) 一、半保留复制的实验依据和意义 DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 原核生物复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 两个特点： DNA 新链生成需引物和模板； 新链的延长只可沿5? → 3?方向进行 。 二、DNA聚合酶（DNA polymerase） 依赖DNA的DNA聚合酶 DNA核苷酸转移酶 DNA聚合酶(DNA-pol) 这类酶的共同性质: 1.以脱氧核苷三磷酸(dNTP)为前体催化合成DNA; 2.需要模板，按碱基互补原则合成子链; 3.需要引物，不能起始合成新的DNA链;催化dNTP加到生长中的DNA链的3‘-OH末端; 4.催化DNA合成的方向是5→3 （一）DNA-pol的核酸外切酶活性和及时校读 （二）复制的保真性和碱基选择 DNA聚合酶靠其大分子结构协调非共价（氢键）与共价（磷酸二酯键）键的有序形成。 嘌呤的化学结构能形成顺式和反式构型，与相应的嘧啶形成氢键配对，嘌呤应处于反式构型。 又称为反转录酶，为依赖RNA的DNA聚合酶 一、基因突变的意义 原核生物基因是环状DNA，双向复制的复制片段在复制的终止点(ter)处汇合。 ori ter E.coli 82 32 ori ter SV40 50 0 （三）复制的终止 复制过程小结 7. RNA酶切除引物；DDDP I填补空隙； 8.连接酶连接。 1. DnaA识别复制起始点（82位点）并结合于串连重复顺序区，促使局部解链。 2.DnaB在DnaC协助下结合并沿链方向移动置换出DnaA，形成复制叉。 3. SSB结合于解开的DNA单链。 4.形成引发体（DnaB，DnaC，引物酶和局部DNA）。 ATP供能下合成RNA引物。 5. Topo酶解除打结及缠绕，形成利于复制的负超螺旋。 6. 延长方向：5’－3‘。领头链；随从链形成冈奇片段。 直至Termination（32位点）而终止。 二、真核生物的DNA生物合成 （一）复制的起始 （二）复制的延长 （三）复制的终止 染色体两端DNA子链上最后复制的RNA引物，去除后留下空隙该如何填补？ 自学内容 注意：原核生物 E.Coli 的DNA是环状双链 真核 已知：DDDP 不能催化两个游离的dNTP 聚合） 而且DNA单链的母链还易被DNase水解。 生物为线状双链DNA。 5? 3? 3? 5? 5? 3? 3? 5? 问：线性DNA分子如何避免每复制一 次末端就缩短一次？ 5? 3? 3? + 3? 3? 5? 5? 真核生物的端粒和端粒酶 真核生物DNA末端结构是端粒，在端粒酶的作用下形成 。 （TTAGGG）n (telomere and telomerase) 端粒(telomere) 指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。 功能 ? 维持染色体的稳定性 ? 维持DNA复制的完整性 结构特点 ? 由末端单链DNA序列和蛋白质构成。 ? 末端DNA序列是多次重复的富含G、C碱基的短 序列。 TTTTGGGGTTTTGGGG… 端粒酶(telomerase): 端粒酶RNA 端粒酶协同蛋白 端粒酶逆转录酶 组成 a. human telomerase RNA, hTR) b. human telomerase associated protein 1, hTP1 c. human telomerase reverse transcriptase, hTRT 由RNA与蛋白质组成，具逆转录酶活性，以自身RNA为模板合成DNA。 端粒酶的催化延长作 用 爬行模型 母链延长至一定长度后，端粒酶脱离母链，母链以其3`-OH反折，同时起引物和模板的作用 DNA聚合酶完成末端双链的复制 逆转录和其他复制方式 第四节 以RNA为模板，dNTP为原料，按碱基配对规律合成DNA的过程称之。由逆转录酶催化。 逆转录: 逆转录酶（reverse transcriptase）： (RNA-de