春剑和大花蕙兰种间杂交种子无菌萌发及杂交后代的rapd分析-sterile germination of hybrid seeds between cymbidium goeringii and cymbidium hybridum and rapd analysis of hybrid offspring.docxVIP

论文独创性声明本人郑锺声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的 成果。尽钱所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个 人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机 构的学位戒证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贯献均巳 在论文中作了明确的说明并表示了谢意.阳路每啤 U;(O 年 b 月 1日关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留并向国家有 关部门或机构滋交论文的复印件和电子版，允许论文被资阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描 等复制手段保存、汇编学位论文.同意四川农业大学可以用不同方式在不间媒体上发表、传播学 位论文的全部或部分内容.唰咄咄nnv 唰咄咄nnv m川川no m川川au川川 川nu唰唰唰nu川川川no川川肌肌 A1·川Y导师接名: zdc 浦品。f(l 年。月 I 日μ/，0 年 4月21 日摘要本研究以春剑‘翠仙， (C)柳fbidium longibracteatum ‘cuixian )、大花慧兰‘黄金虎 (C. Moring Moon ‘GreatTIg时)、‘溪流， (C. hybridium Enzan Stream‘ωphe邸)为材 料进行种间杂交，对杂交种子进行非共生萌发试验，井边用 RAPD分子标记对杂交 Fl 代进行分析。本研究的目的是通过兰属种间杂交方法培育出新的种质，并在分子水平 上评价杂交后代特性，为春剑与大花惠兰的杂交育种进行基础性的探索工作.主要研 究结果如下。1.以春剑为母本，大花慧兰为父本均能获得杂交果实，其中春剑‘翠仙 x大花惠兰 ‘溪流结果率最高，为 78.5%; 以大花慧兰为母本，春剑‘翠仙为父本，杂交结果率均为0; 春剑为试材进行自交易于成功，结果率为 100%0 2.杂交种子无菌萌发的最适培养基为: MS+NM0.1mgIL+6-BA0.5mgIL+丁ηptone伽时汁ACI000m g/L;原球菜增殖的最佳培养基为: 1/2MS+NMO.5mg/L+6-BAO.5 mgIL+KTO.05m 以J 增殖系数为6.07; 直径大小为O.3cm的原球茎最适宜增殖培养， 增殖系数为6.10; 培养基中添加 15伽19IL酵母漫膏，对原球茎增殖有明显促进作用: 原球茎分化芽酶的最佳培养基为: MS+NMO.l mgIL+6-BA 2.0mgIL+Tryptone250mgIL+AC 1.0gIL，分化率为 88.33%; 原球茎分化丛生芽的最佳培挥基为: MS+NAAO.2m gIL+Tryptone25伽此十四ZI.OmgIL，丛生芽增殖系数最高为 5.38; 适合根形成与生长的 培养基为: MS+AC 1.0g/L和MS+NMO.lm gIL+AC 1.0gIL，生根率为 1∞%，平均根妖 2.4-2.54cm; 获得根数最多的培养基为: MS+NMO .lmgIL+ACO.5g1L，平均根数2.06 条/茵:采用泪合慕质(腐殖土 z 陶位=5: 1混匀〉栽植，成活率达 93.02%03.用21个RAPD随机引物共扩增出 180条复性好且清晰的条带，其中多态性 DNA 条带1ω条，占总带数的 91.11%，平均每个引物产生8.57条带和7.81条多态性条带:杂 交Fl 代偏向来本大花想兰‘溪流 (X)遗传，与其相似性系数的变化范围 0.7222叶.7722.关键词t 春剑;大花慧兰:种问杂交:无菌萌发:杂交后代; RAPD 标记AbstractS阳dies were carried Out On distant hybridizati On and hybrid seed generation in vil仰 using Cymbidium /ongibracteatum ‘cui对an，C. Moring Moon ‘伽eat 1iger，C. 均，bridium Enzan 加-eam‘臼phe邸制 material.ηle progenies and 由eir p刷刷 were analysed byRAPD markers. The Objective Of the 如dies w;部 tO creat new g创mplasm by distant crOss.The main results are as fOllows.Hybrid fruit cOuld be Obtained using Cy唰阴1协bidium /o咆n g汕ibrαa，ctωeα阳tum 槌伽伽e 岛female par唰， C.hybridium 臼由e m