Cs-ACS3基因克隆与表达载体的构建.DOCVIP

Cs-ACS1基因克隆与转化黄瓜研究曲淑娟 宋波 夏蓓蓓 苏承刚 张兴国*（西南大学园艺园林学院，重庆400715）摘 要：采用PCR方法，从全雌系黄瓜基因组DNA中扩增出2333 bp的基因片段，BLAST分析结果表明:所克隆的基因序列与Cs-ACS1仅有1个碱基的差异，与Cs-ACS1G的核苷酸序列同源性为98%，而推导氨基酸完全一致；结果表明所克隆的基因为Cs-ACS1基因。同时，构建了该基因的正义表达载体，并导入黄瓜，获得2株转基因植株。关键词：Cs-ACS1基因；植物基因表达载体；转基因黄瓜植株雌花出现早、数量多和分布均匀，是黄瓜早熟、高产和稳产的基础，而黄瓜雌性系在简化杂交制种程序、降低种子生产成本和保证杂种纯度等方面具有显著的优势。因此，黄瓜雌性分化的研究在发育生物学领域占有十分突出的地位。有关黄瓜雌性分化机制的推断有多种[1, 2]。从遗传学角度看，F基因控制雌性表达，但其表达强度受到环境及一些背景基因的修饰[3,4]。从分子生物学角度看，黄瓜雌性花的分化取决于一个基因家族，家族成员包括Cs-ACS1、Cs-ACS2、Cs-ACS3、Cs-ACS4基因[5]。其中，最早克隆的黄瓜ACC合成酶基因（Cs-ACS1）受生长素等诱导，却与雌性表现无关；通过Southern杂交显示存在一个与之同源的、与雌性控制F位点紧密连锁的基因Cs-ACS1G，此基因与雌性系有相