分子生物学技术介绍ppt课件.pptVIP

行业处理客户投诉的技巧课件神经内科医疗质量及管理规范神经疾病病情观察及能力培养社区老年痴呆的全科诊疗身边的侵害和保护少先队礼仪文化知识培训 实验基本技术 分子生物学部分 存在问题 1. 基本的实验技能 2. 实验习惯 3. 责任感和安全性 核酸纯化技术 离心分离技术 凝胶电泳技术 核酸定量技术 分子杂交技术 序列分析技术 ……………… 一 核酸纯化技术 方法 样品+等体积饱和苯酚 10kb以上轻柔混匀；10kb以下振荡 离心（12000*g） 取上清 核酸相 Protein变性相 有机相 二 离心技术 原理 离心力：F= ω 2rm RCF=F/G= ω 2r/g =（2π * rpm）2r/g =1.119*10-5(rpm)2r 浮力密度：K=m-mp0/p 沉降阻力：f*(dx/dt) RCF=k+ f*(dx/dt) 差速离心—密度梯度离心 操作 离心机分类：普通 6000rpm 高速 20000-25000rpm 超速 30000-80000rpm 平衡 温度-离心力-转速 转头：角转，平转，垂直转 三 凝胶电泳技术 原理 等电点：DNA pI=6.0-7.0 琼脂糖-PAG：支持介质 U=V/E=（d/t）/（v/l） =Q/(6 π rη) 电泳影响因素 1. DNA物理性质 质粒： CC＞L ＞OC 线形：㏒10M 正比 1/m 2. 介质性质 ㏒10U= ㏒10U0-KrT 分离范围：agrose：100bp-60kb PAG：5-500bp 3. 电压：5v/cm 4. 缓冲液：TAE，TBE，TPE 四 核酸定量技术 行业处理客户投诉的技巧课件神经内科医疗质量及管理规范神经疾病病情观察及能力培养社区老年痴呆的全科诊疗身边的侵害和保护少先队礼仪文化知识培训