生物分离工程复习的资料.docVIP

生物分离工程复习资料根据最后两节课笔记整理，已经包含老师提到但是最后没有重复的内容，请根据个人笔记和情况选择记忆，个人水平有限,如有赘余和错误之处请见谅。一、绪论从发酵液、反应液和培养液中分离、精制有关产品的过程称为生物分离工程（Bio-Separations Engineering）亦称下游技术（Downstream Processing） 生物产品的成本构成传统液体混合物产品（分离成本约10%）啤酒、葡萄酒等发酵饮料 （简单固液分离和无菌处理）小分子生物产品（分离成本约30%，分离、精制部分的投资占整个投资的60% ）酒精，丙酮，丁醇，抗生素，有机酸，核酸，酶制剂，单细胞蛋白生物活性产品（分离成本约占整个生产费用的80%-90%）动物细胞培养植物细胞培养基因工程发酵产品如：疫苗、单克隆抗体（规模小，纯度要求高）原料及产品特性：成分复杂（细胞、代谢物、培养基残余物）目标产物浓度低（1%---10%，杂质含量高）收率低 易失活 不稳定性收率计算：由于起始浓度低，杂质多，而产品要求纯度高，因此常需好几步操作，其结果使得生物产品的收率较低。 例：假设每步操作的收率为90%，若包含3步操作，则总收率为（0.9）=72.9%，若包含6步操作，则总收率真为53.1%。生物分离过程设计的原则：时间短 (放罐后 必须尽快提取) 温度低 PH适中 清洁卫生，勤清洗消毒。 生物安全（bio-safety）问题，要在密闭状态下将菌体排放到指定位置防止菌体扩散。 生物下游技术的一般操作流程：发酵液→预处理→固液分离→固：细胞（液：发酵液）→细胞破碎→细胞碎片分离→初步纯化→高度纯化（精制）→成品加工工业应用的生物分离技术回收技术: 絮凝，离心，过滤，微过滤。细胞破碎技术: 球磨，高压匀浆，化学破碎技术 超声波 酶初步纯化技术: 沉淀，离子交换，萃取，膜分离技术，盐析法，有机溶剂沉淀高度纯化技术:离子交换，结晶，重结晶，各类层析如：亲和，疏水，聚焦，离子交换，凝胶等成品加工 喷雾干燥，气流干燥，沸腾干燥，冷冻干燥，结晶细胞碎片的分离（与细胞液比重相差不大，故较难分离）：膜分离、梯度离心、双水相萃取提取方法：吸附、沉淀、萃取、超滤、结晶精制方法：重结晶、离子交换、色谱分离、膜分离成品加工方法：浓缩、干燥、无菌过滤、成型分离效率的评价：评价一个分离过程的效率主要有三个标准。即：目标产物浓缩程度(concentration factor) 分离纯化程度(separation factor) 回收率(recovery rate)C-浓度 、F-流速 下标：T-目标产物、X -杂质、c-原料、p-产品、w-废料 例如CTC：指原料中目标产物的浓度 Fc Fp原料 分离器 废料 CTC CTX CTP CXP FW CTW CXW 废料 mT=CTP/CTC mX= CXP/CXC α= （CTP/CTC）/( CXP/CXC)=mT/mX=AP/ACR=FPCTP/FCCTC×100% R=VPCTP/VCCTC×100% C、P、W分别表示原料、产品和浓缩率m二、预处理预处理的目的：有利于固液分离;变发酵液的物理性质，促进从悬浮液中分离固形物的速度，提高固液分离器的效率（改善发酵液过滤特性）；尽可能使产物转入便于后处理的一相中（多数是液相）；去除发酵液中的部分杂质，以利于后续各步操作。发酵培养液的特性: 成分复杂;目标产物浓度低;浮物颗粒小，（相对）密度与液相相差不大，故较难分离；压缩性大，粘稠，非牛顿流体，流变行为复杂；质不稳定，随时间发生变化。含有大量杂质。由于所需的产品在培养液和菌体中浓度很低，并与许多杂质夹杂在一起，同时发酵液或生物溶液又属于非牛顿型流体，所以必须进行预处理。常用的改善发酵液过滤特性的方法及原理：加水稀释 降低液相粘度提高过滤速率。 升温 降低液相粘度提高过滤速率。 调整PH 改变电荷性质和温度，使两性物质溶解度下降，产生絮凝，继而沉淀。凝聚与絮凝 采用凝聚与絮凝，促使胶体物质分离。 加入助滤剂 改变固相可压缩性，助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，主要使滤饼疏松，滤速加大。 加入反应剂 使某些物质沉淀或分解。若加水一倍，则稀释后液体的粘度必须下降50%以上才能有效提高过滤速率。凝聚：是指在电解质作用下，由于胶粒之间双电层排斥电位的降低而使胶体体系不稳定的现象。 胶体脱稳后粒子相互聚集成１ m