PFOS潜在的胰脏毒性研究.pptxVIP

PFOS潜在的胰脏毒性研究;TEXT;研究背景： 目前的研究表明：PFOS是一类具有全身多脏器毒性的环境污染物——具有遗传毒性、雄性生殖毒性、神经毒性、发育毒性和内分泌干扰作用等多种毒性； 但是还未见报道有胰腺毒性的文章。若干文章只是提及或是推断可能存在胰腺毒性： ;;;斑马鱼胰腺发育生物学中的强大工具：pancreatic-related transgenic lines ;Ref: Holly A. Field, P.D. Si Dong, Dimitris Beis, and Didier Y.R. Stainier* Formation of the digestive system in zebrafish. II. Pancreas morphogenesis;技术路线;预期目标：;研究方案（部分）;石蜡切片基本流程;Q-PCR （一）反转录反应 反应体系 ;（二）Real Time PCR反应 1. 反应体系;2. 二步法PCR反应程序 Stage 1：预变性 Reps：1 95℃ 30sec Stage 2：PCR反应 Reps：40 95℃ 5 sec 60℃ 30sec Dissociation Stage;Schematic representation of zebrafish pancreas development.;初步筛选13个基因;;;成鱼血糖浓度测定基本流程;可行性分析： 1.技术角度：前期基本掌握了其中几项实验技术，包括胚胎整体原位杂交、Q-PCR相关技术、免疫组化；实验条件具备待探索的技术则有石蜡切片；血糖浓度测定已有报道/血液中胰岛素测定则有一定难度（尚无相关文章，需借鉴其他动物或人体中检测的方法） 2.研究的基点： 本实验室对PFOS毒性的另一个靶器官的研究结果表明：hb9在暴毒后表达有显著变化。 ; 目前试验进度： 这个课题并不是孤立的；它的提出是建立在之前的研究基础上的。首先要做的是仔细分析之前的研究结果：包括石蜡切片和原位杂交的一些图片，看看能否提供有效信息，甚至直接可用到本课题。目前看来，还是得重新暴毒做切片；至于后者，实验条件必须改进 下阶段的进度安排： 十月底之前，摸清石蜡切片的实验条件，从中找出些能够引导下面实验的变化；确定下面的具体研究方向 ; 特色与创新之处： 本课题存在一定的难度和风险：以斑马鱼的胰脏作为毒理学研究的靶器官还是首次，很多技术/方法都是借鉴发育生物学中所用较成熟技术；PFOS毒性较为广泛，但目前还无完整的关于其在胰腺毒性上的报道，值得探索 预??成果（不可测） ;预备方案： 1.用替代化合物——已确定的具有胰腺毒性的，比如五氯苯酚 2.PFOS或可有其他方面的毒性：0.5μM子代不可存活，或有其他原因；早期做石蜡切片观察，以期有发现* ;Thank you!