2013高考生物一轮复习课件：第11单元 第43课时　生物技术在组织培养、DNA和蛋白质分离及有效成分提取中的应用3.13.pptVIP

* 从而实现样品中不同分子的分离。当待分离分子所带电荷相同时，分子量越大，电泳速率越慢。 (4)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。 * 体会　不同物质的提取分离方法 提取方法 方法步骤 适用范围 水蒸气蒸馏 水蒸气蒸馏、分离油层、除水过滤 适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油 压榨法 石灰水浸泡、漂洗、压榨、过滤、静置、再次过滤 适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取 有机溶剂萃取 粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩 适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中 * 典例1　(经典高考题)下列叙述中错误的是 (　　) A．改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出 B．在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色 C．用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质 D．用透析法可去除蛋白样品中的小分子物质 易错警示 对DNA粗提取与鉴定原理和蛋白质提取分离模糊 不清 错因分析　对两项技术手段的原理模糊不清。 * 解析　 在不同浓度的氯化钠溶液中DNA的溶解度不同，在0.14 mol/L的氯化钠溶液中溶解度最小，DNA析出，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物中；在2 mol/L的氯化钠溶液中溶解度最大，DNA呈溶解状态，过滤后存在于滤液中。 纠错笔记　(1)DNA溶解度与NaCl浓度的关系(如图)。(2)两次添加蒸馏水的目的不同：第1次是使红细胞吸水涨破；第2次是降低NaCl浓度，析出DNA。 (3)因为DNA易吸附在玻璃容器壁上，所以实验中最好使用塑料烧杯和试管，以减少DNA的损失。盛放鸡血细胞液的容器最好也是塑料的。 答案　A * (4)DNA与蛋白质提取的比较 提取物质 提取方法 提取原理 步骤 DNA 盐析法 ①在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；②DNA不溶于酒精，但某些化合物溶于酒精 ①溶解在2 mol/L的NaCl溶液中； ②NaCl溶液加水稀释至0.14 mol/L，使DNA析出、过滤； ③加入冷酒精析出 血红蛋白 凝胶色谱 法、电泳法 ①根据相对分子质量的大小； ②各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同 ①样品处理； ②粗提取； ③纯化； ④纯度鉴定 * 排雷　 PCR扩增技术和DNA复制的比较 DNA复制 PCR扩增技术 场所 细胞核内 生物体外 原理 碱基互补配对 碱基互补配对 酶 DNA聚合酶、解旋酶 耐热的DNA聚合酶(Taq酶) 条件 模板、ATP、引物链(RNA)、常温 模板、ATP、引物链(DNA及RNA片段)、温度变化(90～95℃→55～60℃→70～75℃) 原料 四种脱氧核苷酸 四种脱氧核苷酸 特点 形成的是整个DNA分子，一个细胞周期只复制一次 短时间内形成大量目的基因DNA片段，呈指数增长——2n * 考点137　 生物科技实践应用——血红蛋白的提取和分离 1．蛋白质分离的依据 蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来提取和分离不同种类的蛋白质。 2．凝胶色谱原理 (1)识图析图 凝胶色谱法分离蛋白质的原理 * 图A，相对分子质量较小的蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而被滞留；相对分子质量较大的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面，在颗粒之间迅速通过。 图B，①蛋白质混合物上柱；②洗脱开始，相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内；相对分子质量较大的蛋白质则被排阻于颗粒之外；③相对分子质量较小的蛋白质被滞留，相对分子质量较大的蛋白质向下移动；④相对分子质量不同的分子完全分开；⑤相对分子质量较大的蛋白质行程较短，已从层析柱中洗脱出来，相对分子质量较小的蛋白质还在行进中。 相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 * 蛋白质 比较　　 相对分子质量大 相对分子质量小 凝胶内部 不能进入 能进入 运动方式 垂直向下 垂直向下和无规则扩散运动 经过路程 较短 较长 洗脱次序 先流出 后流出 (2)列表比较  提醒　凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果，但直径过大造成洗脱液体积大，样品稀释度大；凝胶色谱柱的高度与分离度有关。 * 3．凝胶电泳法原理 凝胶电泳法的原理是不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的