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法医物证学 南方医科大学法医学系 台运春 亲子鉴定Paternity testing 1920年，欧洲将血型用于亲子鉴定 1935年，美国开始亲子鉴定 1985年，PCR技术发明/使亲子鉴定从排除走向认定 基于PCR的STR分型已成为非常成熟的技术手段，商业化试剂盒的开发和自动测序仪的应用，结果科学可靠。 案件量（例/年）：美国，20000；德法，3000余；我们中心2010年1800余。 妊娠期限：280±14天，早产儿、过熟儿 性交能力和生殖能力：受精期间 遗传特征（遗传性状）：最主要的依据 遗传特征 遗传标记分类 红细胞型、白细胞型、血小板型 用于亲权鉴定的遗传标记的要求 遗传方式明确 遗传标记的分型终身不变，具有体细胞的稳定性和遗传的稳定性 检测方法稳定。不同实验室、不同批次的结果相同 具有遗传多态性 基因产物水平遗传标记的局限性 为基因编码产物，多态信息容量小，应用价值有限 在基因表达过程中受许多因素影响，不能正确反映DNA多态性情况 某些血型系统存在生理性变异和病理性变异，使判型错误 易受环境中各种理化因素影响而失活，检材难以保存 检测方法多样、复杂，技术、人为误差较大 DNA遗传标记的优点 直接检测遗传物质DNA的组成，不受表达过程环节影响 是显性遗传标记，遗传路径明确 多态性程度高，可达到肯定和否定结论 检材类型广泛 可进行复杂亲权关系鉴定 比较稳定，不易受生理、病理影响 DNA标记的发展 1980：White首次描述限制片段长度多态性 (RFLP)标记 1985：Jeffreys发现可变数目串联重复(VNTR) 1985：聚合酶链反应(PCR)第一篇论文发表 1988：FBI开始利用DNA分析协助办案 1991：短串联重复序列(STR)第一篇论文发表 1995：英国开始建立DNA数据库 1998：美国启动CODIS（DNA检索系统）数据库 2001：人类基因组计划HGP完成/同时发现300万SNP …… 短串联重复序列（short tandem repeat/ STR） 也叫微卫星DNA/是由2-6bp长的“核心序列”串联重复构成。STR在人类基因组中分布广泛/平均每6-10kb就出现一个。绝大多数位于非编码区/极少数在编码区域。 重复单位的长度 TH01/ a simple locus ( TCAT ) 3-14 单核苷酸多态性（single mucleotide polymorphisms/ SNPs） 案例分析 简要案情：刘某自称是吕某包养的二奶/且与其生有非婚生孩子陈某某（男）。吕某与其妻子张某生有一子吕某某（男）。现吕某意外死亡/由于涉及遗产纠纷事宜/张某和刘某共同委托要求鉴定陈某某是否是吕某的亲生孩子。 个体识别Individual Identification 一个案例引发我的注意 委托鉴定女式内裤裆部明显斑痕是否含精液成分 试纸条检测阳性，但阳性区域条带颜色较质控区条带和阳性对照略弱 沉渣涂片镜检未发现精子细胞，仅见上皮细胞 二步消化法上清和沉渣分别用ID试剂盒扩增，结果：上清一女性基因型，无三带；沉渣无基因型检出 Y-STR试剂盒检测无结果 假阳性？ 陈森等（2005）“抗P30胶体金免疫试纸条灵敏度和特异性探讨” 女性黄体期、服用避孕药或激素药物以及某些疾病时，女性阴道分泌液也可出现弱阳性 精斑鉴定处理 涂片镜检作为精斑检测的常规 有无精子 估算精子细胞和/或上皮细胞的量 试纸条阳性时要考虑有无假阳性可能 考虑有混合斑可能且女性成分含量较多时做Y-STR检测 DNA在个体识别中的应用 强奸案 凶杀案 碎尸案 灾难性事件 抢劫案 盗窃案 性丑闻等 STRs Highly discriminating Abundant in genome Amenable to automation Discrete alleles Non-isotopic Low-quantity DNA PCR-based Degraded DNA Rapid typing advantages 是指基因组内特定核苷酸位置上存在着2种不同的碱基/其中较少的一种在群体的频率不少于1%。通常表现出二态性。 优势： 丰富 遗传稳定性 序列多态性 2.1 总体思路 检测遗传标记的表型/观察否符合相应遗传规律，并进行统计学计算，判断血缘关系 DNA 核DNA 线粒体DNA 常染色体 性染色体 X染色体 Y染色体 父系遗传 母系遗传 22对/孟德尔 DNA类型 奶→父→孙女 常用STR基因座及在染色体上的位置 CSF1PO D5S818 D21S11 TH01 TPOX D13S317 D7S820 D16S539 D18S51 D8S1179