细菌的生理与培养特性ppt课件.pptVIP

第二节 细菌的生理与培养特性;1 细菌的营养类型 ;2 细菌的生长繁殖条件;需氧菌（aerobe）: 专性需氧菌(obligate aerobe)：结核分枝杆菌 微需氧菌（microaerophilic bacterium ）：氧浓度5-6%，空肠弯曲菌、幽门螺杆菌 厌氧菌（anaerobe）: 专性厌氧菌(obligate anaerobe) :破伤风梭菌、肉毒梭菌 缺乏呼吸酶 ① 缺乏氧化还原电势较高的酶:细胞色素、细胞色素氧化酶,不能氧化营养物质获得能量 ② 缺乏过氧化物酶与过氧化氢酶:缺乏分解有毒氧基团的酶,不能处理代谢中产生的O2－和H2O2 O2－---? H2O2---?H2O 兼性厌氧菌（facultative anaerobe）: 大多数病原菌 ;;;;4 细菌的代谢与生化反应 ;4.1 糖类（碳水化合物）的代谢试验 4.1.1 糖、醇、苷类发酵试验 原理：各种细菌因含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，所以分解糖类的能力不同，有的能分解多种糖类，有的仅能发1－2种糖类，还有的不能分解。细菌分解糖类??产生的代谢产物因菌种不同而异，有的仅产酸，有的产酸、产气，故可利用此特点以鉴定细菌。;4.1.2 葡萄糖代谢类型鉴别试验 原理：又称氧化/发酵（O/F）试验。细菌在分解葡萄糖的代谢过程中根据对氧分子参加的需要，分成两种类型：需要氧分子参加的氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖。这类细菌通常为兼性厌氧菌。不分解葡萄糖的细菌，称为产碱型。 应用：可用于鉴别肠杆菌科细菌（发酵型）与非发酵菌（氧化型或产碱型）。也可用于鉴定葡萄球菌（发酵型）和微球菌（氧化型）。;4.1.3 β－半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 原理：产β－半乳糖苷酶的细菌，能分解邻硝基酚－β－半乳糖苷（ONPG），生成黄色的邻硝基酚。 应用：迟缓发酵乳糖的肠杆菌ONPG实验阳性，如埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属等。不发酵乳糖的细菌如沙门菌属、变形杆菌属为阴性。本试验为迟缓发酵乳糖细菌的快速鉴定方法。;4.1.4 甲基红试验 原理：某些细菌在代谢过程中分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸可进一步代谢分解为乳酸、甲酸、乙酸等，使培养基的pH值下降到4.5以下，加入甲基红指示剂即显红色（甲基红变红的范围为pH 4.4-6.0);如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、酮、醛、气体和水），培养基pH值在5.4以上，甲基红试验呈橘黄色。 应用：主要用于大肠埃希菌（阳性）和产气肠杆菌（阴性）的鉴别。 肠杆菌中许多细菌甲基红试验也阳性，如沙门菌、志贺菌、枸橼酸杆菌、变形杆菌等为阳性，肠杆菌属、克雷伯菌属为菌种为阴性。;4.1.5 V－P（Voges-Proskaurer）试验 原理：细菌分解葡萄糖产生丙酮酸，进一步将丙酮酸脱羧成为乙酰甲基四醇，后者在碱性环境中被空气中的氧氧化成为二乙酰，进而与培养基中的精氨酸等所含的胍基结合，形成红色的化合物，即V－P试验阳性。 应用：本试验常与甲基红试验一起使用。二者结果通常相反。即如大肠埃氏菌、沙门菌、志贺菌等甲基红呈阳性反应，而VP反应则为阴性。沙雷菌、阴沟肠杆菌等，VP反应为阳性，而甲基红反应为阴性。 ;4.2 蛋白质、氨基酸分解产物试验 4.2.1吲哚试验（靛基质试验） 原理：有些细菌具有色氨酸酶，能分解培养基中的色氨酸，生成吲哚。吲哚与试剂对二甲氨基苯甲醛作用，形成玫瑰吲哚而呈红色。 应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。 ;4.2.3 硫化氢试验 原理：有些细菌能分解含硫氨基酸生成硫化氢，遇铅盐或低铁盐形成黑色沉淀，此试验可间接反映待检细菌是否有促成硫化氢生成的能力。 应用：用于肠道杆菌鉴定试验，沙门氏菌属、爱德华菌属、枸橼酸杆菌属及变形杆菌等为阳性，肠道杆菌中其他菌属为阴性，沙门菌属中的甲型副伤寒沙门菌也为阴性。;4.2.4 氨基酸脱羧酶试验 原理：细菌分解氨基酸使其脱掉羧基，生成胺和CO2的反应，叫脱羧反应，细菌所产生的脱羧酶。各种细菌所产生的脱羧酶不一样，但氨基酸经脱羧后所产生的胺，均可使培养基变碱性，可以用指示剂显示出来。 应用：沙门菌属中除伤寒和鸡沙门菌外，其余沙门菌的鸟氨酸和赖氨酸脱羧酶试剂均为阳性。志贺菌除宋氏和鲍氏志贺菌外其他志贺菌均阳性。故可作为肠杆菌科细菌鉴定的重要方法。此外，对链球菌和弧菌科细菌的鉴定也有重要价值。;4.2.5苯丙氨酸脱氨酶试验 原理：产苯丙氨酸脱氨酶的细菌，使苯丙氨酸脱去氨基生成苯丙氨酸，在生长的菌苔上滴加三氯化铁试剂，可观察到绿色的化合物。 应用：本试验特异性较高，主要用于肠杆菌科细菌之鉴定。变形杆菌属、摩根菌属和普罗威登菌属细菌均为强阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。;4.3 碳源利用试