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1.1工具酶的发现与基因工程的诞生

选修3 现代生物科技专题 Modern Biotechnology 1、基因工程 2、克隆技术 3、胚胎工程 4、生物技术的安全性和伦理问题 5、生态工程 1.1 工具酶的发现和基因工程的诞生 1、什么是基因: 有遗传效应的核酸片段(遗传物质) DNA RNA 遗传物质 或 真核生物、原核生物、DNA病毒 RNA病毒 2、什么是基因工程: 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程诞生的理论基础 DNA是生物遗传物质 DNA双螺旋结构 遗传信息传递方式 基因工程诞生的技术保障 准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) ——限制性核酸内切酶 DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) ——DNA连接酶 基因转移工具(“分子运输车”) ——(质粒)载体 限制性核酸内切酶 1、定义:能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 2、来源: 主要在细菌中。 4000种 3、种类: 4、特点: 特异性, 即识别特定核苷酸序列,切割特定切点 例如:大肠杆菌的一种限制性核酸内切酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 重播 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 限制性核酸内切酶 1、定义:能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 2、来源: 主要在细菌中。 4000种 3、种类: 4、特点: 特异性,即识别特定核苷酸序列 5、作用部位: 磷酸二酯键,不是氢键。 基因的针线:DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 用同种限制酶切割 磷酸二酯键,不是氢键。 1、连接酶的作用: 将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起,形成的DNA分子称为重组DNA分子。 2、连接的部位: DNA连接酶 试比较限制性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶? 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基因送入细胞的工具就是载体。 1、条件: ①能自我复制 ②含有限制性内切酶的位点 ③含有筛选标记,一般为抗性基因 ④能启动外源目的基因的转录和翻译 ⑤对受体细胞无害 载体 1、条件: 2、种类: ①细菌、酵母菌中质粒载体 ②改造和修饰后的噬菌体 ③动植物病毒 载体 ①能自我复制 ②含有限制性内切酶的位点 ③含有筛选标记,一般为抗性基因 ④能启动外源目的基因的转录和翻译 ⑤对受体细胞无害 标记基因, 便于检测重组DNA分子 质粒是能自主复制的双链环状DNA分子 质粒载体 知识点: 1、基因定义; 2、基因工程定义; 3、基因工程的3种工具; 4、限制性内切酶的特点; 5、限制性内切酶和DNA连接酶的作用部位; 6、载体的种类和最常见的载体; 7、作为载体所需具备的5个条件。 11.7.5生物作业: ①整理知识点 ②世纪金榜-知能提升作业(一) * *

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