《微生物学实验》(The Experment of Micrology)教学大纲.docVIP

基础生物学实验C——《微生物学实验》教学大纲 课程编号 学时：25.5 学分：1.5 开课对象：生物科学 课程类别：专业的必修课 英文译名： Basic Biology Experiment ( C) 一、教学任务和目的 微生物实验是微生物学的重要组成部分，是生物专业的必修课。通过本实验的教学，应使学生掌握微生物学的基本技能，为曰后更深的研究打下基础，并能胜任初等中学的教学要求。要求学生掌握以无菌操作和纯种培养为重点的基本实验技术，了解微生物的生理生化鉴定特征，以及微生物育种的一般方法和微生物在工业、农业、医学、环境和日常生活中的某些应用。 二、教学基本要求 使学生掌握微生物实验的基本操作技术，验证、理解并拓宽理论知识 培养学生的综合能力，即观察、思考、分析、解决问题的能力 在实验的过程中，培养学生在科学研究中的严肃的态度，严密的科学实验方法和严谨的工作作风为他们能适应未来更高层次的研究和胜任以后的工作岗位奠定了良好的基础 三、教学内容 （一）牛肉膏蛋白胨、高氏1号、马丁（链霉素、孟加拉红、去氧胆酸钠）、豆芽汁葡萄糖培养基的配置、灭菌物品的准备及灭菌 1、目的要求 （1）了解培养基的配置原理 （2）了解培养基配置的常规程序 （3）学习和掌握牛肉膏蛋白胨、高氏1号、马丁（链霉素、孟加拉红、去氧胆酸钠）、豆芽汁葡萄糖培养基的配置方法。 （4）了解高压蒸汽灭菌的原理 （5）学习并掌握高压蒸汽灭菌的操作。 2、材料用品 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水、可溶性淀粉、牛肉浸膏、 葡萄糖、 酵母浸膏、 磷酸氢二钾、七水硫酸镁、 磷酸二氢钾、 孟加拉红(1%)、链霉素、 黄豆芽、去氧胆酸钠、1NNaoH、1NHCl；三角瓶、培养皿、试管、1mｌ吸管、棉花、纱布、剪刀、报纸、高压蒸汽灭菌锅、玻璃棒、大烧杯、ｐＨ试纸、量筒、天平、绳等。 3、内容与方法 （1）准备灭菌材料 （2）配制牛肉膏蛋白胨、高氏1号、马丁、豆芽汁葡萄糖培养基 （3）将包装后的灭菌物品用高压蒸汽灭菌锅灭菌 （4）将装于试管的固体培养基摆斜面，其它准备材料妥善放置。 （二）、土壤中细菌、放线菌、酵母菌及霉菌计数、分离与纯化 1、目的要求 （1）学习掌握细菌、放线菌、酵母菌及霉菌稀释分离技术、划线分离技术。 （2）学习从样品中分离、纯化出所需菌株。 （3）学习并掌握平板倾注法、涂布法和斜面接种技术，了解培养细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物的培养时间和培养条件。 （4）学习平板菌落计数法。 2、实验材料 （1）土样 取土样(如诸暨黑李果园)，铲去表土层2-3cm深土壤10g，装入已灭过菌的广口瓶内，记录时间及环境。 （2）培养基（平板及斜面） 牛肉膏蛋白胨、高氏1号、马丁氏（链霉素、孟加拉红、去氧胆酸钠）、豆芽汁葡萄糖 （3）无菌水 250ml三角瓶装99ml无菌水2瓶，250ml三角瓶装95ml无菌水（霉菌），每瓶装10粒玻璃珠。每组5支试管，装4.5ml无菌水 （4）其它物品 无菌培养皿、无菌移液管（5支/组）、、无菌玻璃涂棒、称量纸、试管架、药勺、10%酚溶液 接种环、 3、实验内容及方法 （1）稀释各样品 （2）牛肉膏蛋白胨培养基涂布法分离细菌、 （3）豆芽汁葡萄糖培养基涂布法分离酵母菌、计数并挑取某个菌落做斜面划线培养。 （4）高氏1号培养基倾注法分离放线菌、计数并挑取某个菌落孢子做平板培养。 （5）马丁氏培养基倾注法法分离霉菌、计数并挑取某个菌落孢子做平板培养。 （三）、细菌的形态结构观察（菌落形态、革兰氏染色及个体形态） 酵母菌的形态结构观察（菌落形态、美兰染色及死活鉴别） 1、目的要求 （1）识别细菌、酵母菌的菌落形态特征（观察细菌、酵母菌的菌落形态、大小、色泽、透明度和边缘特征。 （2）掌握细菌涂片方法及革兰氏染色步骤，并在显微镜下观察细菌的形态。 （3）酵母菌的细胞形态及出芽观察，并掌握区分酵母菌死活的染色方法。 2、实验材料 （1）药品 0.05%的吕氏碱性美兰 结晶紫染液 卢戈氏碘液 95%乙醇 蕃红（复红） 香柏油 二甲苯 （2）菌种 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 自接菌种（可疑细菌和酵母） 待定菌种 酿酒酵母 （3）其它物品 显微镜 擦镜纸 载玻片 吸水纸 盖玻片 3、实验内容与方法 （1）观察自接菌种（可疑细菌和酵母）的平板、斜面菌落或菌苔形态 （2）革兰氏染色。 （3）观察大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、自接菌种（可疑细菌）、待定菌种的细胞形态。 （4）酵母菌的美兰染色及死活细胞的鉴别。 （四）芽孢及荚膜染色 1、目的要求 学习几种细菌的特殊的染色方法，包括芽孢及荚膜染色。 观察各染色特征 2、实验材料 （1）菌种 枯