1RNA的生物合成.pptVIP

帽子结构的意义： ?因子的作用原理 ?因子 DNA RNA RNA聚合酶 2. 非依赖Rho因子的转录终止 ① 转录出的新RNA形成稳定的茎环结构，阻碍RNA聚合酶 前移。 ② 转录产物茎环结构之后有一串寡聚U。rU:dA最不稳定， RNA-DNA杂交双链解开，RNA脱离，转录终止。 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列（终止子），使得RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 终止子 (terminator)：DNA模板上能够在转录即将结束时，提供终止信号的序列。通常为一段被间隔开的回文序列，存在于RNA pol已经转录过的序列中。 5’ 5’ 3’ 3’ 回文序列 茎环结构使转录终止 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol 近终止区的转录产物形成发夹结构（茎环结构）， 使RNA聚合酶变构，转录停顿； 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 真核生物的转录过程 The Process of Transcription in Eukaryote 第三节 一、 真核生物的RNA聚合酶 真核生物具有3种不同的RNA聚合酶 RNA聚合酶Ⅰ（RNA PolⅠ） RNA聚合酶Ⅱ（RNA PolⅡ） RNA聚合酶Ⅲ（RNA Pol Ⅲ） 真核生物的RNA聚合酶 中度敏感 极敏感 不敏感 对鹅膏蕈碱的反应 5S rRNA tRNA, snRNA hnRNA 45S rRNA 转录产物 III II I 种类 RNA polⅠ、Ⅱ、Ⅲ都由多个亚基组成。有些亚基是三种酶所共有。 mRNA是各种RNA中寿命最短、最不稳定的，需经常重新合成。因此RNA polⅡ是三种酶中最活跃的。 RNA polⅡ最大亚基的羧基末端有一段共有序列(consensus sequence)为Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser的重复序列片段，称为羧基末端结构域(carboxyl-terminal domain, CTD)。 CTD是RNA pol Ⅱ所独有的，对于维持细胞的活性是必需的。 二、真核生物的转录起始 需要启动子 、RNA pol和转录因子的参与 不同物种、不同细胞或不同的基因，转录起始点上游可以有不同的DNA序列，但这些序列都可统称为顺式作用元件。 （一）真核生物基因的启动子 真核生物和原核生物的RNA pol种类不同，结合模板的特性不一样。转录起始时，原核生物RNA pol可直接结合模板，而真核生物的RNA pol需与多种蛋白因子的相互作用才能结合模板。 顺 式 作 用 元 件 启动子（核心序列） 启动子上游元件 增强子 (enhancer) / 沉默子 (silencer) 远隔序列 起始子(intiator, Inr)：与转录起始点重叠 能够结合特异基因调节蛋白，促进/抑制 邻近或远隔特定基因表达的DNA序列。 (1000~50000nt) GC盒和CAAT盒 (-40~-100nt) Hognest盒或TATA盒 (TATA box) 近端 调控 元件 真核生物启动子 起始子 +1 （二） 转录因子 反式作用因子 (trans-acting factor) 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子 (transcriptional factors, TF)。 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ TBP: TATA结合蛋白，TAF: TBP辅因子 CTD: RNA聚合酶大亚基羧基末端的结构域 蛋白激酶活性，使CTD磷酸化 TF II H ATPase 57(?)34(?) TF II E 解螺旋酶 30，74 TF II F 促进RNA-polII结合及 作为其他因子结合的桥梁 33 TF II B 稳定TFIID-DNA复合物 12，19，35 TF II A 结合TATA盒 辅助TBP-DNA结合 TBP*38 TAF** TF II D 功能 亚基组成 分子量 (kD) 转录因子 （三） 转录起始前复合物 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子，形成转录起始前复合物(pre-initiation complex, PIC) 。 POL-Ⅱ TFIIF IIA IIB 由RNA-Pol II催化转录的PIC RNA polⅡ TFIIF IIH IIE TBP TAF TFIID-IIA-IIB-DNA复合物 TATA IIA IIB TBP TAF TATA IIH IIE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 三、真核生物的转录延长 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 RNA pol前移处处都遇上核小体。 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因