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转Bt基因玉米对土壤微生物量碳氮影响 　　摘要: 利用三室根箱装置获得玉米生长室(S1)、根际土(S2)、非根际土(S3)3个不同根区土壤，研究了转基因玉米Bt11及其非转基因亲本玉米播种后40，50和60 d各根区土壤微生物量碳、氮的变化。结果表明，转Bt基因玉米播种后40 d各根区土壤微生物量碳与非转基因亲本玉米相比无显著差异，土壤微生物量氮显著升高；播种后50 d土壤微生物量碳、氮均显著高于亲本；播种后60 d转Bt基因玉米S1根区土壤微生物量碳、氮含量显著降低，S2根区土壤微生物量碳较亲本玉米显著下降，微生物量氮则显著升高，S3根区土壤微生物量碳、氮均高于亲本玉米。转Bt基因玉米土壤微生物量碳氮比在各采样时期均与亲本存在差异，依玉米生长时期和根区的变化而不同。 　　关键词： 转Bt基因玉米；土壤微生物量碳氮；根箱 　　中图分类号： S 154文献标识码： A 　　文章编号： 1009-5500(2011)03-0035-05 　　玉米(Zea mays)是我国第二大作物，近年来总产量和单位面积产量仅次于水稻，在农业生产中的地位日趋重要。随着农业、畜牧业的发展，玉米约70%用作饲料[1]，已基本退出了粮食的范畴，成为主要的饲料作物。2009年我国畜牧业产值占农业总产值的比重为34%，仍有巨大发展潜力和广阔的发展空间，种植普通玉米品种的产量和营养物质含量均较低，满足不了畜牧业对高品质饲料玉米日益增长的需求，而通过转基因可获得优良基因，改变玉米的某些遗传特性[2]，培育出高产、优质、抗病、抗虫、抗除草剂等的新品种。据国际农业生物技术应用推广站(ISAAA)信息，2009年转基因玉米种植面积为4 170万hm2，占转基因作物总种植面积的31%[3]，2009年11月27日中国通过了转植酸酶玉米安全证书。但是，随着转基因作物商品化进程的加快，其对环境带来的潜在风险也成为了人们关注的焦点。 　　转基因作物在栽培过程中其外源基因及其表达产物(如Bt毒素)可能通过根系分泌物、植物残体分解或秸秆还田以及花粉飘落等途径进入土壤，引起土壤生态系统的改变[4]。在生态风险评估中，除了转基因作物与野生亲缘种间的基因漂流、靶标生物的抗性及对非目标生物物种多样性的影响之外，还应包括对土壤生态环境、土壤微生物群落结构和多样性影响的研究[5-8]。土壤微生物量碳氮反映了土壤中微生物的活动状况，受土壤温度、水分、营养状况及作物品种等因素的影响，对环境条件非常敏感，能较早地指示生态系统功能的变化[9，10]，是评价土壤生态系统变化的重要指标。目前，国内的研究主要集中于评价耕作栽培、施肥等措施对土壤微生物量的影响，而对转基因作物种植后土壤微生物量碳氮变化研究较少，缺乏有关种植转基因玉米对土壤微生物量影响的研究。因此，以转基因玉米Bt11及其非转基因亲本玉米为研究对象，比较了Bt玉米和亲本玉米3个采样时期不同根区土壤微生物量碳氮的变化，以期为建立转基因玉米对土壤生态系统风险评价体系提供技术支撑。 　　1 材料和方法 　　1.1 试验材料 　　供试Bt玉米为Bt11，以玉米(Zea mays)NK4640为亲本转入cry1Ab 基因培育而成，试验中对照为其非转基因亲本NK4640，这2个品种均由吉林省农业科学院生物技术研究中心提供。供试土壤为潮土，取自中国农业科学院武清转基因生物农田生态环境影响野外科学观测试验站中未种植过转基因作物的土地，土壤的有机质含量为10.69 g/kg，全N 0.63 g/kg，全P 1.35 g/kg。 　　1.2 试验设计和样品采集 　　试验在农业部环境保护科研监测所网室进行，采用非透明有机玻璃加工而成的三室根箱装置，装置长13 cm,宽8 cm，高12 cm，植物生长室宽3 cm，两个土壤室宽度均为5 cm。植物生长室和两个土壤室之间用30 μm孔径的尼龙网相隔，将根系限制在中室生长，以便于将植物根系与土壤分开。这一设计在充分避免根系生长进入相邻土壤室，实现各室间物理分离的同时，又确保了土壤养分及根系分泌物等的室间迁移。将取自试验站的新鲜土壤自然风干，过1 mm筛，装入各根室用作盆栽土壤，每盒装土1.2 kg。 　　试验设转基因玉米Bt11和其非转基因亲本玉米2个处理，各4次重复。2009年7月10日播种，每盒播种2粒种子，待3叶期时，留苗1株。日常管理中用称重法补充水分，维持土壤17%的含水量。播种后第10 d施肥1次，将(NH4)D2SO4和KHD2PO4配成液体肥料施入，施N肥量200 mg/kg，P 150 mg/kg，K 188 mg/kg；分别于播种后40,50和60 d采样。玉米种子播种于植物生长室，土壤样品采集时，取植物生长室土壤用S1表示；两侧土壤室紧贴尼龙网一侧4 mm内的土壤作为根际土[11,12]，用S2