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一、目的与要求 1、了解血清甘油三酯含量测定的正常值与临床意义 2、掌握血清甘油三酯化学法测定的基本原理及主要技术方法 甘油三酯的生理意义 甘油三酯（TG）的化学组成 TG是体内主要的能量来源 血清中90%～95%是TG 临床意义 血清甘油三酯/三酰甘油（TG）是一项重要的临床血脂常规测定指标 临床检测TG浓度主要用于高脂血症、胰腺炎、肝肾疾病、动脉粥样硬化症和营养学评价 正常值：0.22~1.21mmol/L 测定方法 化学法、酶法和色谱法 化学法： 有机溶剂抽提 碱水解（皂化）TG 氧化甘油生成甲醛，然后用显色反应测甲醛 比较准确的是二氯甲烷-硅酸-变色酸法（Van Handel-Caslson法） 色谱法 酶比色法 实验操作步骤： 1、抽提 取三只干燥小试管加入样品、TG标准液、蒸馏水，抽提剂及硫酸，充分振荡5min； 静置5min后，吸取上层液。 2、皂化反应 取三只大试管加入上清液各0.5ml，然后分别加入异丙醇及皂化试剂，混匀后，放置65℃水浴5min。 3、氧化显色 加入氧化试剂过碘酸，混匀后再加入乙酰丙酮和氨的混合液，摇匀， 65℃水浴15min，取出冷却后于420nm处比色。 结果计算 ： TG mg/100ml ＝A测定管/A标准管×1×0.2÷0.2×100 TG mmol/L ＝TGmg/dl×10÷885 ＝TGmg/dl×0.011 注意事项： 1、 抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上层液，吸取上层液时不能吸入下层液 2 、选用小试管时试管口径不能太细 3、试管使用时需要干燥，清洗需要用洗涤剂 分光光度计的使用 * * 实验二十六 血清甘油三酯含量测定 Assay of Triglyceride content (乙酰丙酮法) TG 3RCH2COOK + 甘油 + 2HIO4 2HCHO+HCOOH HCHO+2CH3COCH2COCH3+NH4+ 3, 5-二乙酰-1, 4-二氢二甲基吡啶 与同样处理的标准管进行比色，可测出甘油三酯的含量。 氧化 乙酰丙酮法： 皂化 显色 T = I/I0， A = - lg T Lambert-Beer 定律（p.11） A= KcL 标准管法： A测:A标= C测:C标 4、比色法 C测 = A测/A标×C标 标准应用液1mg/ml×0.2ml 1、打开分光光度计，预热20-30min。 2、调节旋钮至需要的光波长。 3、检查拉杆是否在分光光度计的休息状态。 调100% ： Ｔ档 拉杆1档 空白管 调0% ： Ｔ档 拉杆2档 测吸光度： Ａ档 拉杆3、4档 标准管，测定管 休息状态： 拉杆2档
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