2010版药典微生物检验主要增修订内容课件.ppt

湿热灭菌法 增订了选择湿热灭菌条件时应综合考虑的因素，如灭菌物品的热稳定性、热穿透力以及微生物污染程度等 修订了F0值的概念，突出了等效121℃标准灭菌时间的含义 规定当选用F0值概念进行灭菌程序控制时，除了对灭菌程序进行验证外，还必须在生产过程中对微生物进行监控，证明其数量低于设定的限度 对热不稳定物品，强调应在生产全过程对产品中污染的微生物进行连续监控，并防止耐热菌的污染。规定这一类产品的F0值一般不低于8min，删除了“如产品的热稳定性很差时，可允许湿热灭菌的F0低于8”的规定。 过滤除菌法 对过滤器孔径的定义进行了说明，强调孔径与微生物的截留性能有关，而不是平均孔径的分布系数 根据滤器孔径的定义，规定用于最终除菌的过滤器，必须选择除菌级过滤器，并应提供截留实验证明 对过滤器的稳定性以及与被过滤液体的相容性进行了规定，明确过滤器使用者具有了解并评估这些性能的责任 增订了滤膜完整性测试的标准，指出该测试标准应来自于相关细菌截留实验的数据 规定了过滤操作的生产环境－无菌环境，将原标准中的“建议”修订为“应” 生物指示剂的制备 规定生物指示剂在制备完成后，应测定D值和孢子总数。 抑菌剂效力检查法指导原则 前言 产品分类 培养基 测定方法 前言 规定了本指导原则的用途：测定抑菌剂活性，评价抑菌效力；指导制剂研发中抑菌剂的选择 指出由于抑菌剂存在一定毒性，故制剂中抑菌剂的量应为最低有效剂量 指出本指导原则用于包装未开启的成品制剂 产品分类 根据不同用途产品对微生物污染风险耐受程度的差异，将产品分成四类： 1类：注射剂、其他费肠道制剂，包括乳剂、耳用制剂、无菌鼻用制剂及眼用制剂 2类：局部给药制剂、非无菌鼻用制剂及用于黏膜的乳剂 3类：口服非固体制剂（非抗酸制剂） 4类：非固体抗酸制剂 培养基 培养基不同与微生物限度检查法，主要采用TSB和TSA用于细菌生长，沙氏葡萄糖肉汤和琼脂培养基用于真菌生长 培养基适用性检查标准菌种与微生物限度检查略有不同，使用铜绿假单胞菌代替枯草芽孢杆菌 测定方法 菌种来源：除了培养基适用性检查中的菌种外，允许使用制剂中常见的污染微生物 菌液制备：允许使用固体或液体培养基制备工作用菌种，并采用比浊法制备每1ml中含108cfu的菌悬液 供试品接种： 容器选择以供试品原包装容器为首选，当供试品性状、装量等因素限值时，允许将供试品转移至其他无菌容器中，但转移应不影响供试品的特性。 取供试品至少5份，接种试验菌，根据供试品类别不同，试验菌的接种量有所区别，体积不得过供试品体积的0.5％～1％，放置温度为20～25℃，应避光 存活菌数测定 可使用平皿法或薄膜过滤法 测定细菌用TSA，测定真菌用沙氏葡萄糖琼脂培养基 测定方法必须进行验证 测定结果应进行对数转换 结果判断：与初始值进行比较，并判断是否符合规定 药品微生物实验室规范指导原则 前言 人员 培养基 菌种 实验室的布局和运行 设备 文件 实验记录 结果的判断 前言 规定了该指导原则用于指导质量控制 指出制订实验室规范的必要性 人员 人员的专业背景 人员培训应覆盖仪器设备操作、微生物检验技术和实验室生物安全等 应通过内部质量控制、能力验证或使用标准菌株等方法评估检验人员的能力 培养基 培养基的制备 应按处方配制培养基，也可使用市售的脱水培养基 配制培养基的水应该是纯化水 培养基灭菌一般采用湿热灭菌技术，特殊培养基可采用薄膜过滤除菌 培养基应采用验证合格的灭菌程序灭菌。应对高压灭菌器的蒸汽循环系统进行验证，确保在一定装载方式下的正常热分布 应确定每批培养基灭菌后的pH值（25℃下测定） 应对分装后的培养基进行质量检查，并记录批数量、有效期及无菌情况等信息 培养基的贮藏 自配培养基应标记名称、批号、配制日期等信息，商品化的成品培养基应标记名称、批号、生产日期和失效期等信息。 灭菌后的培养基应尽快从灭菌器内取出，琼脂培养基应防止冷冻，容器应密闭，防止水分流失；琼脂平板宜临用新配，如置冰箱保存，一般不超过一周，如需延长，则应对保存期进行验证。 固体培养基灭菌后只允许再融化一次，一般采用水浴加热或流通蒸汽的方式，如使用微波炉，应避免过度加热和水分流失。融化后的培养基应置45～50℃的水浴中保温，时间不得超过8小时。 * 根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 * 2010年版中国药典微生物检验主要增修订内容 浙江省食品药品检验所 王知坚 增修订背景 药品微生物限度检查、无菌检查各论标准化的研究 药品微生物限度检查用培养基灵敏度检查方法的研究 中国药典与国外药典细菌计数方法的比较 离心集菌法标准化的研究 贴膏剂微生物限度检查法的研究 大肠菌群检查用培养基的比较 白色念