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乳腺癌微血管密度与转移和预后关系 　　【摘要】目的：探讨乳腺癌中微血管密度（MVD） 与转移.预后.组织学分型的关系，MVD采用内皮细胞标记（CD34）或血管内皮因子（VⅢ因子）标记的可行性。方法 应用免疫组织化学EnVision二步法（Dako EnVisionTM Kit）标记 CD34、Ⅷ因子检测乳腺癌MVD。结果VⅢ因子标记116例乳腺癌的MVD平均值是12.88±2.51，CD34 标记116例乳腺癌MVD平均值是13.45 ±2.74，MVD值与淋巴结转移显著相关（pF0.99 （1，114）；MVD值与五年生存期呈负相关（p　　【关键词】乳腺癌；转移；组织分型；预后；免疫组织化学 　　【中图分类号】R271.44【文献标识码】A【文章编号】1004-4949（2013）09-42-03 　　乳腺癌是一种高度异质性的疾病[1]。近年来，国内外文献报道恶性肿瘤的转移和预后与微血管数（microvessl density，MVD）有关，但是有关乳腺癌MVD与其预后关系，目前仍存在争议，一些研究认为微血管数定量可以作为乳腺癌预后判断的指标[2-8]。也有人认为MVD不能预测癌的复发与预后[9]。为此，我们采用血管内皮因子（Ⅷ因子）和内皮细胞标记（CD34）检测116例乳腺癌的MVD，并对有完整随访资料的46例进行分析，进一步探讨乳腺癌MvD值与转移、预后组织学分型的关系，以期更好地为临床治疗和判断预后提供依据。 　　1材料和方法 　　1.1标本来源：所有病例选自昆明医科大学附属延安医院，按下列程序和方法筛选病例。（1）选自 2002～2012年间行乳腺癌根治术和改良根治术的116例，其中46例有完整的随访资料，从术后随访到死亡，存货病例随访5年以上未见复发或者转移征象，最长达10年。（2）有肿瘤原发灶蜡块保存。（3）对乳腺癌组织类型按照WHO进行分类。（4）作为Ⅷ因子相关抗原和CD34检测。116例患者均为女性，年龄29～83岁，平均为44.5岁；手术时无腋窝淋巴结转移者46例（其中有随访资料的21例中，5年内死亡的为6例）；手术时无腋窝淋巴结转移者70例（其中有随访资料的25例中，5年内死亡的为1例，5年后尚未死亡的10例）；在46例有完整的随访资料的病例中，有29例为手术后未满5年而且尚未死亡者。 　　1.2实验试剂和方法：用常规石蜡切片做Ⅷ因子和CD34检测，一抗为鼠抗人单克隆抗体（Kit-9701），工作浓度为即用型，监测系统为：链霉素抗生素蛋白-过氧化酶免疫组化染色超敏试剂盒（Dako EnVisionTM 二步法Kit，丹麦基因生物技术开发公司），按说明书操作方法进行，显色剂为DAB。 　　1.3Ⅷ因子、CD34标记的MVD值：指癌巢间及癌巢周围染棕黄色的单个内皮细胞或者内皮细胞簇为一个血管标记，参照Bosasi[6]和Kolkman[7]的标准，在400倍的视野下选择微血管数最多的5个视野进行计数，每例切片先后计数两次，求平均值。 　　1.4组织学分型方法：根据组织发生和形态结构将乳腺癌分为导管癌、小叶癌和特异性癌三大类。 　　1.5将Ⅷ因子和CD34标记的MVD用线性回归分析检测她们的相关关系。 　　1.6统计学处理：各组数据平均值采用X±S表示，用T检验，线性回归采用F检验。 　　2结果 　　2.1用Ⅷ因子标记的116例乳腺癌患者的MVD平均值是12.88±2.511，有淋巴结转移的46例乳腺癌患者的MVD平均值是14.51±2.67，无淋巴结转移的70例乳腺癌患者的MVD平均值为11.80±1.70，两者相差显著（p0.05）. 　　2.2用CD34标记的116例乳腺癌患者的MVD平均值是13.45±2.74，有淋巴结转移的46例乳腺癌患者的MVD平均值是15.47±2.67，无淋巴结转移的70例乳腺癌患者的MVD平均值是12.12±1.83.两者相差显著（p0.05）. 　　2.3116例乳腺癌患者，采用Ⅷ因子和CD34标记的MVD值之间呈显著线性正相关（F=97.7，远远大于F0.99（1，114）+6.96），其线性回归方程式：y=4.54+0.62x（注x代表CD34表达的MVD值，y代表Ⅷ因子表达的MVD值），统计结果见附表。 　　附表MVD与淋巴结转移、5年生存期、组织学分型的关系 　　MVQ的表达1分组1例数1MVD（个，X±S）1T值1P值Ⅷ因子 　　2讨论 　　乳腺癌是中年妇女最常见的恶性肿瘤，预后较差，其中血行和淋巴的转移是患者死亡的主要原因。因此，迫切需要寻找一种简单可行的以预测乳腺癌的转移及判断愈后指标，辅助指导临床的治疗。为此我们重点观测乳腺癌的肿瘤性血管生成与患者预后的关系，及肿瘤微血管密度与乳腺淋巴一血路转移的相关性。 　　现已研究表明，实体肿瘤的生长是血管依赖性的，血