微生物遗传学突击资料.docVIP

最后三套题一、真核生物染色体的组成和结构DNA 蛋白质 各约一半蛋白质：组蛋白 非组蛋白组蛋白：含碱性氨基酸多，进化上保守，主要有五种—— H1，H2A ，H2B，H3，H4 非组蛋白：含量少，种类多，与基因活性的调节、转录密切相关结构，组成核小体：核小体是染色体的基本结构单位，由DNA和组蛋白(histone）构成，是染色质（染色体）的基本结构单位。由几种组蛋白：H1（H5）、H2A、H2B、H3和H4组成， 每一种组蛋白各二个分子，形成一个组蛋白八聚体，约200 bp的DNA分子盘绕在组蛋白八聚体构成的核心结构外面，形成了一个核小体。着丝粒：着丝粒是分裂中期两条姊妹染色单体相连的紧缩区妹染色单体相连的紧缩区域，是与动粒（一种与纺锤体相连的蛋白复合体）的复制场所端粒: 端粒是形成真核生物染色体的线型DNA分子末端的特化了的序列，由许多短重复序列构成（人类是5’ －TTAGGG－3’）；这些序列是由端粒酶以独立于正常DNA复制的机制合成的，其功能是保护染色体末端免受降解二、RecA蛋白在同源重组中的功能和作用RecA蛋白质是一个单肽链是同源重组中最重要的蛋白质又叫做重组酶。 RecA蛋白质是 个单肽链,是同源重组中最重要的蛋白质.又叫做重组酶。其活性：1.单链DNA结合活性；2.双链DNA结合活性；3.NTP酶活性：在单链DNA或双链DNA存在时，RecA能水解ATP(dATP), GTP(dGTP), UTP(dUTP)，水解CTP(dCTP)的活性较低。4.促进互补单链复性的能力三、复性动力学方程的推导，复性曲线及其一般规律二级反应方程反应时间将c/co对cot作图，S型曲线—Cot曲线? 可用以区分真核生物和原核生物基因组。?原核生物为单一顺序的复性曲线常只有一个拐点，而真核生物为重复顺序常有多个拐点。COt 比值变化范围:原核生物的COt比值为100 原核生物的COt比值为100,真核生物的COt比值大于100影响复性反应的因素DNA片段的大小；DNA的浓度；DNA复杂性; 温度（最佳复性温度一般比Tm低25?C）；盐的浓度（复性时要求盐浓度足够高：单链上电荷屏蔽，易聚集）四、简述微生物的错配修复机制直接修复：光修复，在可见光的激活下，光修复酶结合于胸腺嘧啶二聚体处，并催化解聚为单体的。和DNA聚合酶的外切酶活性。切除修复系统：碱基切除(Base excision)—糖基化酶系统：1) 尿嘧啶糖基酶切除U；2) 无嘌呤核酸内切酶(AP内切酶)制造切口；3) 由PolI和DNA连接酶修复。?核苷酸切除（Nucleotide excision）—uvrABC 系统：E. Coli修复内切酶组成：UvrA，UvrB，UvrC核苷酸切除过程1. uvrA 和uvrB 蛋白识别 损伤部位。2.发现二聚体后，uvrA解离 ，uvrC 加入。3. uvrB和uvrC在损伤部位的两端造成单链缺口。4. 损伤部位的DNA 被一种helicase（uvrD ）移走。5. DNA上的缺口由DNA polymerase I 和ligase填补错配修复系统：主要用于对应的DNA链上不互补的碱基，错配是由于在DNA复制中新生链上的碱基与互补链上的碱基不互补产生的。通常错配系统倾向于修复新生链上的碱重组修复系统: 该系统用于DNA复制时模板链上含有损伤的碱基的特定情况—其修复过程与遗传重组过程相似。DNA复制时TT存在，使损伤位点不能作为模板，复制被迫跳跃过去。DNA polI接近TT时，停止合成互补链 然后又在更下游的位置开 停止合成互补链，然后又在更下游的位置开始合成，因此在新生链上留下一段缺口SOS修复系统: 一种能够引起误差修复的紧急呼救修复，是在无模板DNA 情况下合成酶的诱导修复。正常情况下无活性有关酶系，DNA受损伤而复制又受到抑制情况下发出信号，激活有关酶系，对DNA损伤进行修复，其中DNA多聚酶起重要作用，在无模板情况下，进行DNA修复再合成，并将DNA片段插入受损DNA空隙处。SOS修复系统中的两个重要蛋白LexA：一种阻遏蛋白，结合于SOS系统中各基因的操作子上，关闭这些基因；RecA：有3种活性：重组活性；单链DNA结合活性；蛋白酶活性（活化需单链DNA，只作用于少数蛋白，LexA是其中之一）SOS基因：又称din基因(damage induced genes), 是LexA控制的基因，有的基因只在DNA复制受抑制的时候才表达，有的在正常细胞中表达量低， 表达有的在 常细胞中表达量低DNA受损伤时表达量剧增。五、简述原核生物的同源重组机制主要的机制是Holliday机制和同源重组的酶学机制:RecBCD蛋白质?定义:由两条同源区的DNA分子,通过配对,链的断裂和再连接而产生片段交换的过程叫 的断裂和再连接,而产生片段交换的过