乙型肝炎病毒感染与TGF―β1和TNF―α相关性研究.docVIP

乙型肝炎病毒感染与TGF―β1和TNF―α相关性研究 　　【摘要】 目的：探讨HBV感染与TGF-β1和TNF-α的相关性。方法：酶联免疫吸附法（ELISA）检测慢性乙型肝炎患者血清TGF-β1和TNF-α水平；免疫组化法检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎核心抗原（HBcAg）、TGF-β1和TNF-α的表达。结果：HBV感染者血清TGF-β1和TNF-α明显高于对照组，差异有统计学意义。肝组织TGF-β1和TNF-α表达明显增强，与非HBV感染组相比，差异有统计学意义。结论：HBV感染与TGF-β1和TNF-α水平密切相关，可以作为诊断和治疗的一个判断指标。 　　【关键词】 乙型肝炎病毒； 转化生长因子β1； 肿瘤坏死因子α； 相关性 　　转化生长因子-β（transforming growth factor-β， TGF-β）是一组新型的细胞因子，包括三种功能相似的TGF-β1、β2和β3。其中TGF-β1还与原癌基因表达相关[1]。肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor alpha， TNFα）是一种主要由巨噬细胞和单核细胞产生的促炎细胞因子，并参与正常炎症反应和免疫反应。TNFα在许多病理状态下产生增多，包括败血症、恶性肿瘤、心脏衰竭和慢性炎性疾病[2]。有关慢性乙型肝炎患者与TGF-β1和TNF-α水平相关性以及肝组织中TGF-β1和TNF-α表达水平的报道不多[3-4]。为此，本实验采用ELISA法检测乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）阳性和阴性患者血清中TGF-β1和TNF-α的水平，用免疫组织化学法对肝病患者肝组织和正常肝组织中的HBV的便面抗原（Hepatitis B surface antigen，HBsAg）和核心抗原（Hepatitis B core antigen，HBcAg）以及TGF-β1和TNF-α在肝组织中的表达，以探讨两者与HBV感染的相关性。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 血清标本 分为两组，即HBV感染组和正常对照组。HBV感染组来源于本中心门诊及住院患者，HBV血清学阳性，排除其他疾病，确定为HBV感染者共46例，其中男31例，女15例，平均年龄31岁。正常对照组为本中心门诊体检者，排除其他重大疾病，HBV血清检测阴性，共20例，平均年龄33.1岁。两组间性别、年龄差异无统计学意义。各组均抽取空腹不抗凝静脉血，血块凝缩后以3000 r/min速度离心15 min，取上清液放置于-20℃冰箱冻存备用。 　　1.1.2 肝脏组织标本 收集病理科2000-2009年手术切除肝组织存档蜡块及肝活检标本共46例。通过免疫组化染色，按HBV的血清标志物便面抗原HBsAg和核心抗原HBcAg是否显色作为感染标准，从而分为HBV阳性肝组织标本与HBV阴性两组。 　　1.2 方法 　　1.2.1 血清TGF-β1和TNF-α的检测 采用酶联免疫吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay， ELISA），按试剂盒说明书操作（试剂盒购自深圳晶美生物技术有限公司）。 　　1.2.2 免疫组化染色检测 TGF-β1单克隆抗体、HBcAg多克隆抗体、HBsAg单克隆抗体以及S-P试剂盒均购自福州迈新公司，TNF-α单克隆抗体购自北京中山公司。免疫组化详细步骤按试剂说明书要求进行。结果判断 以HBsAg和HBcAg阳性确定HBV 感染。TNF-α、TGF-β1根据细胞显色程度及阳性比例来评分[5]。 　　1.3 统计学处理 用SPSS统计软件进行数据处理，计量资料比较采用t检验和直线相关分析。计数资料采用 字2检验。以P 　　综上所述，TGF-β1和TNF-α与慢性乙型肝炎密切相关。TGF-β1和TNF-α水平的检测和在肝组织中表达的评估可作为疾病的诊断、治疗和预后的指标。 　　参考文献 　　[1] Vieira AR. Association between the transforming growth factor alpha gene and nonsyndromic oral clefts： a HuGE review[J]. Am J Epidemiol，2006，163 （9）： 790-810. 　　[2] Brynskov J， Foegh P， Pedersen G， et al. Tumour necrosis factor alpha converting enzyme （TACE） activity in the colonic mucosa of patients with inflammatory bowel disease[J]. Gut，2002，51（1）： 37-43