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乳鼠成纤维细胞在人血清中存活与增殖研究 　　【摘要】 目的：本研究旨在证明人血清直接培养乳鼠成纤维细胞是可行的。方法：将乳鼠成纤维细胞分别在胎牛血清及人血清中培养，通过在显微镜下观察成纤维细胞形态及密度，同时用MTT比色法检测吸光度来对比成纤维细胞在胎牛血清及人血清中的增殖活性。结果：两种实验方法均显示：两组成纤维细胞在第一天的增殖活性无显著性差异，第四天人血清组的成纤维细胞增殖明显比胎牛血清组活跃。结论：乳鼠成纤维细胞在人血清中不仅可以存活，而且有增殖行为。 　　【关键词】 成纤维细胞； 人血清 　　Observation on Surviving and Proliferation of Neonatal Rat Fibroblasts in Human Serum/XIAO Yang， LI Yu-shu，DONG Ping-shuan.//Medical Innovation of China，2014，11（31）：015-017 　　【Abstract】 Objective： To prove that human serum directly is feasible to culture rat fibroblasts. Method： Rat fibroblasts were cultured in serum and fetal bovine serum， by observing the morphology and density of fibers under a microscope， and with the MTT ratio test to compare the absorbance of cells into proliferative activity in serum and fetal bovine serum. Result： There was no significant difference between two groups in the first day； but the fibroblast’s proliferation rate in human serum was higher than in fetal bovine serum. Conclusion： Neonatal rat fibroblasts in human serum can survive and proliferate in human serum. 　　【Key words】 Fibroblast； Albumin Human 　　First-author’s address： The First Affiliated Hospital of He’nan University of Science and Technology， Luoyang 471003， China 　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.31.005 　　成纤维细胞是结缔组织中常见的细胞，由胚胎时期的间充质细胞分化而来，细胞扁平，多突起，呈梭形、三角形、不规则形，它参与人体的纤维化过程。过度纤维化会导致器官形态及功能的异常，心脏的纤维化可导致心脏扩大、心衰、心律失常等[1]，因此心脏纤维化是目前心脏研究的热点。研究过程中常会用到成纤维细胞，但限于成纤维细胞的取材限制，常用实验动物的细胞，多用动物血清培养[2]，但用人血清直接培养的却很少。本研究旨在证明人血清直接培养乳鼠心脏成纤维细胞的可行性，为成纤维细胞在人体中的增殖研究提??依据。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 乳鼠（SD大鼠）；胰酶1：250（Amresco公司生产）；胶原酶B型（Roche公司生产）；DMEM高糖培养基（Gibico公司生产）；噻唑蓝MTT（Sigma公司生产）；二甲基亚砜DMSO（Amresco公司生产）；倒置显微镜（Olympus公司生产，型号IX74 TH4-200）；酶标仪（BIO-TEK公司生产，型号ELX 800）。实验分组：选择胎牛血清组为对照组；选择正常人15例为实验组，年龄（57.0±1.3）岁。 　　1.2 方法 　　1.2.1 实验材料处理方法 　　1.2.1.1 实验血清处理方法及原代培养液制备 将无菌促凝管中抽取的成人动脉血，置于4 ℃温度下1 h，待血液凝固后，离心（3000转/min）10 min，取上清置于离心管中，实验用的胎牛血清从试剂公司购回，在无菌超净台中将其分装至无菌小瓶中看，置于-20 ℃冰箱中冻存备用。每次使用时将其置于室温下完全溶解即可使用。将处理好的人或胎牛血清加入达尔伯克（氏）改良伊格尔（氏）培养基，血清浓度为10%，有