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分光光度法测定氰化氢方法探讨 　　[摘 要]氰化氢属于一种高毒类物质，可以通过皮肤、消化道、呼吸道及粘膜吸收进入到人体体内，血液中其细胞色素氧化酶中的三价铁与氰化氢中的氰根相结合会形成氰化高铁细胞色素氧化酶，会致使血液细胞丧失携带氧气的功能，导致人体窒息死亡。依据职业卫生规范中所提出的氰化氢测定方法并提出改进措施，采取实验法对其效果改善状况进行探究。 　　[关键词]分光光度法；测定；氰化氢方法 　　中图分类号：TQ547.7 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）31-0186-01 　　氰化氢其属于一种无色气体，散发出一种轻微的苦杏仁气味，具备着强毒性，属于高毒类物质。氰化氢可以通过粘膜、呼吸道、消化道及皮肤进入到人体体内，氰化氢其氰根会与血液中的细胞色素氧化酶中的三价铁进行反应结合，并形成氰化高铁细胞色素氧化酶，最终破坏细胞携带氧气的能力最终丧失，呼吸链中断并导致窒息死亡。本文以职业卫生标准《工作场所空气中有毒物质测定：含氧化合物》中所提供的氰化物测定方法为基础，对其进行一定措施的改进，提高实验效果，为测定氰化氢提供指导。 　　一、分光光度法测定氰化氢方法的试验原理与试验材料准备工作 　　职业卫生，是指的是对于从事职业环境所存在的伤害性与引起疾病的可能性进行辨识、评价与控制中的一门科学。氰化氢属于工业生产领域对人体存在着严重危害的物质，进行氰化氢试验检测，其存在的现实意义重大。 　　（一）分光光度法测定氰化氢实验原理认知 　　设置一定浓度的氢氧化钠溶液，对空气环境中存在的氰化氢溶液进行吸收，对其氢氧化钠溶液施加弱酸性条件，可以与氯胺T之间发生一定作用，并形成氰化氢，氰化氢与异菸酸钠相互作用，在水解后生成戊烯二醛酸，戊烯二醛酸与巴比妥酸产生缩合，形成紫色化合物，采取分光光度法测定氰化氢，实现对氰化氢的测定。 　　（二）分光光度法测定氰化氢仪器准备工作 　　在进行分光光度法测定氰化氢工作时，需要依据试验条件合理选择试验仪器，在本试验操作环境中，选择应用721规格分光光度计，应用CP225D规格的电子天平进行称重作业，准备??量瓶，容量瓶规格为100mL，准备塞闭塞管，其规格为10mL。此外，还应对相关的实验仪器进行调整与校正，确保其工作性能，为测定准确性与可靠性提供支持。 　　（三）分光光度法测定氰化氢试剂准备工作 　　在进行分光光度法测定氰化氢时，需要准备一定的试验试剂进行操作，具体而言，其试剂内容应包括以下内容：准备标准为4g/L的氢氧化钠溶液，标准为10%V/V的乙酸溶液，其酚酞溶液制备应为：溶解于0.1g酚酞于50mL乙醇中，其中乙醇浓度设定为95%，通过加清水进行稀释，稀释到100mL；应用规格为10g/L的氯胺T，氯胺T制备应在试验操作之前进行临时配置；缓冲液制备标准及方法为：缓冲液其制备PH值设定为5.8，选择7.6g磷酸氢二钠与68.0g磷酸二氢钾在1000mL水中制备而成；显色溶液十分关键，其制备方式为：将1g异菸酸与1g巴比妥酸溶解于1000mL吸收液之中，如在显示溶液中出现沉淀现象，则要求进行过滤操作，并置于棕色瓶中在一定温度环境下进行保存；标准溶液制备为：水中氰标准溶液为68g/L，依据GBW080115标准进行制备。如在实验过程中缺乏特殊说明，其试剂应用AR级试剂，实验用水采取蒸馏水。 　　二、分光光度法测定氰化氢试验方法 　　选择6只具塞刻度的试验型号试管，掺入一定量的CN-标准溶液，为研究方便，其标准溶液掺入量分别设定为0.00、0.10、0.50、1.00、1.50、2.00mL，在其标准溶液基础上各加蒸馏水，加至5.0mL，配置为0.00、0.10、0.50、1.00、1.50、2.00μgCN-标准系列。基于标准试液掺入一滴酚酞溶液，通过乙酸溶液发挥中和作用，让酚酞退色，掺入1.5ml量的缓冲液，并加入0.2mL氯胺T溶液，将其轻微摇晃并确保均匀后，盖塞静置，静置时间设定为5min，掺入2.5mL含量的显色溶液，加水到刻度后摇晃均匀。将试管置于25℃-40℃之间的水浴中，其放置时间设定为40min，取出后进行冷却，在600nm波长条件下进行氰化氢吸光度测量。基于每个浓度的试管，为确保其测量精度，需要重复测量三次左右，以吸光度均值对CN-含量绘制相关的标准曲线，获得相关系数与相关标准曲线。 　　三、分光光度法测定氰化氢试验结果与分析 　　依据以上试验方法采取分光光度法测定氰化氢，具体样品及测定试验的相对吸光度值如下表所示： 　　表1：分光光度法测定氰化氢吸光度参数表 　　依据以上参数可以绘制出相关标准曲线，依据上表可以计算出标准曲线，y=0.3789x+0.0053，标准曲线相关系数值R大于0.999，说明该试验曲线满足本实验的设计要求。