普通遗传学11第十一章遗传重组.pptVIP

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普通遗传学11第十一章遗传重组.ppt

本章重点 概念: 同源重组、 基因转换、转座子 比较同源重组、位点专一性重组、转座重组和异常重组分子机制的异同点,说明遗传重组的重要性。 * 重组DNA技术对于研究--基因结构和功能、基因表达和调控、人类对各种疾病(遗传病)的基因治疗 * ⒈需要重组的蛋白质参与,eg.大肠杆菌中的RecA蛋白、RecBC蛋白; ⒉蛋白质因子对DNA碱基序列的特异性要求不高;(存在重组热点和序列长度的影响) ⒊真核生物染色质的状态影响重组的频率。 * 所需条件同源序列、双链间互补碱基配对、重组酶、异源双链区形成 涉及同源序列间的联会配对,且交换的片段较大 (相似或相同片段、碱基配对) * 所需条件同源序列、双链间互补碱基配对、重组酶、异源双链区形成 涉及同源序列间的联会配对,且交换的片段较大 (相似或相同片段、碱基配对) * Homologous chromosomes line up in meiosis (when) The nonsister chromatids exchange equivalent sections (what) * 其中-- 所有模型和 假说都包括 切断、链置 换、连接等 过程 * 均等分裂:等位基因的分离表现出2:2或4:4的分离比 * Λphage进入E.coli后整合到寄主染色体上以及从染色体上切除均 attP 含 POP’三序列240bp(-160~+80) Sne---235bp(-152~+82) * 可动基因(mobile gene):有些基因在染色体上的位置是可以移动的,这类基因称为可动基因,也可称为转座元件或转座因子(transposable element) 15章:已经发现转座这一命名并不十分准确,因为在转座过程中,可移位因子的一个拷贝常常留在原来位置上,在新位点上出现的仅仅是拷贝。因此,转座有别于同源重组,它依赖于DNA的复制。 A transposon?(transposable element) is a DNA sequence able to insert itself (or a copy of itself) at a new location in the genome, without having any sequence relationship with the target locus. * 转座元件是在细菌操纵子中最先被鉴定的自发插入形式。这种序列插入抑制了其插入基因的转录和/或翻译。目前已有许多不同类型的转座元件已被阐明。 转座(因)子是基因组中一段可移动的DNA序列,可以通过切割、重新整合等一系列过程从基因组的一个位置“跳跃”到另一个位置。 一个细菌细胞常带有少于10个IS序列。转座子常常被定位到特定的基因中,造成该基因突变。IS序列都是可以独立存在的单元,带有介导自身移动的蛋白转座酶。催化转座子插入新的位置。 每一种类型都以IS 为前缀,后边加上识别的数字。一般用双冒号来表示特异位点插入,例如,入: :IS1表示一个IS1元件插入噬菌体入。 常常被定位到特定的基因中,造成该基因突变。IS序列都是可以独立存在的单元,带有介导自身移动的蛋白。 IS元件是独立的单元,每个IS元件只编码起始自身转座的蛋白。各种IS元件在序列上都是不同的,但在结构上有共同特征。 * * 图中总结了一些普通IS元件的特点 两端的核苷酸完全相同或相近,但方向相反,称反向重复序列。 本文中“正向”指序列的两个拷贝方向相同,而并非相邻),转座子的一大特征,根据(Prima facie)印象即可断定:此序列源自转座事件。 转座子独立转座事件中重复序列是不同的,但任何IS序列的长度都是固定的(反映其转座机制)。重复序列的普遍长度为9bp。 不同转座子的靶序列长度不同,但对于一个特定的转座子来说,它所复制的靶序列长度都是一样的,如IS1两翼总有9个碱基对的靶序列,而Tn3两端总有5bp的靶序列 多数IS 元件在宿主DNA 的多个位点插入,但也有些有其偏爱的特异宿主位点。 位于末端的位点突变抑制转座,它可被一种与转座有关的蛋白识别。这种蛋白称为转座酶(Transposase)。 不同转座元件的转座频率不同。一般为每代10-3 ~10-4 次/元件。 * 如乳糖发酵基因,能使宿主获得有关基因的特性。 表明IS序列插入到某个功能基因两端时就可能产生复合转座子。 两臂既可是相同方向,也可(大多数是)相反方向, 这些转座子以Tn 加一个数字表示。 表明IS序列插入到某个功能基因两端时就可能产生复合转座子。一旦形成复合转座子,IS序列就不能再单独移动,因为它们的功能被修饰了,只能作为复合体移动。 *

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