(食品微生物检验技术）常见产毒霉菌的鉴定技术.ppt

* 常见产毒霉菌的鉴定技术 产毒霉菌极易在含糖的饼干、面包、粮食等类食品上生长，与食品卫生关系密切的霉菌大部分属于半知菌亚门中的曲霉属、青霉属和镰刀菌属。其产生的毒素主要有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、杂色曲霉素、烟曲霉毒素、单端孢霉烯化合物、玉米赤霉烯酮、伏马菌素以及展青霉素、桔青霉素、黄绿青霉素等。 鉴定原理 霉菌产毒需要一定的条件，影响霉菌产毒的条件主要是食品基质中的水分、环境中的温度和湿度及空气的流通情况 。在食品微生物检验中，对有毒霉菌的检验，主要是根据霉菌菌丝体或孢子的颜色、形态特征等进行鉴别。 鉴定原理 乳酸-苯酚液、查氏培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基、麦芽汁琼脂培养基、无糖马铃薯琼脂培养基、显微镜、目镜测微尺、物镜测微尺、生物安全柜、恒温水浴锅、冰箱、酒精灯、接种钩针、分离针、滴瓶、载物玻片、盖玻片、小刀等。 鉴定器材 预先将检验中的霉菌或检验中分离出的霉菌孢子培养后的霉菌进行纯培养。 鉴定方法 1.菌落的观察 将纯培养物点植于平板上。曲霉、青霉通常接种查氏培养基，镰刀菌通常需要同时接种多种培养基，其他真菌一般使用马铃薯葡萄糖琼脂培养基。将平板倒转，向上接种一点或三点，每菌接种两个平板，倒置于25～28℃恒温培养箱中进行培养。当刚长出小菌落时，取出一个平皿，以无菌操作，用小刀将菌落连同培养基切下1cm×2cm的小块，置菌落一侧，继续培养，于5～14d进行观察。 鉴定方法 2.斜面观察 将霉菌纯培养物划线接种（曲霉、青霉）或点种（链刀菌或其他菌）于斜面，培养5～14d，观察菌落形态，同时还可以将菌种管置显微镜下用低倍镜观察孢子的形态和排列。 鉴定方法 3.制片 取载玻片加乳酸-苯酚液一滴，用接种针钩取一小块霉菌培养物，置乳酸-苯酚液中，用两支分离针将培养物撕开成小块，切忌涂抹，以免破坏霉菌结构。然后加盖玻片，如有气泡，可在酒精灯上加热排除。制片时最好是在接种罩内操作，以防孢子飞扬。 鉴定方法 4.镜检 观察霉菌的菌丝和孢子的形态和特征及孢子的排列等，并做详细记录。 本属的产毒霉菌主要包括黄曲霉、寄生曲霉、杂色曲霉、 构巢曲霉和棕曲霉。 1.营养菌丝体 由具横隔的分枝菌丝构成；无色或有明亮的颜色,一部分埋伏型,一部分气生型。 2.产孢结构 分生孢子梗大都无横隔,光滑、粗糙或有麻点。梗的顶端膨大形成棍棒形、椭圆形、半球形或球形的顶囊,在顶囊上生出一层或二层小梗,双层时下面一层为梗基, 每个梗基上再着生两个或几个小梗。从每个小梗的顶端相继生出一串分生孢子；由顶囊、 小梗以及分生孢子链构成一个头状体的结构,称为分生孢子头。分生孢子头有各种不同颜色和形状 ,如球形、放射形、棍棒形或直柱形等。 曲霉属 霉菌典型的形态特征 霉菌典型的形态特征 构巢曲霉 黄曲霉 黑曲霉 烟曲霉 曲霉属 本属产毒霉菌,主要包括黄绿青霉、桔青霉、圆弧青霉、展开青霉、纯绿青霉、红青霉等。 1.营养菌丝体 呈无色、淡色或鲜明的颜色,具横隔, 或为埋伏型或部分埋伏型部分气生型 。气生菌丝密毡状、松絮状或部分结成菌丝索。 2.产孢结构 分生孢子梗由埋伏型或气生型菌丝生出,稍垂直于该菌丝(除个别种外,不象曲霉那样生有足细胞),单独直立或作某种程度的集合及至密集为一定的菌丝束,具横隔, 光滑或粗糙。其先端生有扫帚状的分枝轮,称为帚状枝。帚状枝是由单轮或两次到多次分枝系统构成,对称或不对称,最后一级分枝即产生孢子的细胞,称为小梗。 青霉属 霉菌典型的形态特征 *