专题1--基因工程(定稿).pptVIP

3.基因表达载体的组成： 它们有什么作用？ a、目的基因 b、启动子 c、终止子 d、标记基因 位于基因的首端,是RNA聚合酶结合位点 位于基因的末端,终止转录 检测目的基因是否导入受体细胞 e、复制原点 目的基因、启动子、终止子不是质粒上固有的，标记基因、复制原点是质粒上固有的。 表达载体在宿主细胞中复制的起点 外源编码蛋白质的基因 ＊如果目的基因是从基因组文库中获取的，因为目的基因本身已含有启动子、终止子，在构建表达载体时，就不需要再加启动子、终止子。 ＊如果目的基因是从部分基因文库中获取的，因为目的基因本身不含有启动子、终止子，在构建表达载体时，就需要再加启动子、终止子。 常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 （三）将目的基因导入受体细胞—转化 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达，称为转化 1、将目的基因导入植物细胞 ①农杆菌转化法 A、能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物无感染能力。当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类物质，吸引农杆菌移向这些细胞，这时 农杆菌的特点： B、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上。 将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞。单子叶植