考纲考点：微生物利用、生物技术在食品加工中应用与植物有效成分提取.docxVIP

【考纲考点：微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用】专题2 微生物的应用一、微生物的培养基1.培养基中的营养成分：培养基一般都含有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，此外，还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。营养物质定义作用主要来源及所涉及的微生物碳源凡是能提供微生物所需碳元素的物质构成生物细胞、生物体及细胞代谢废物无机化合物：CO2、NaHCO3等（自养生物）有机化合物；糖类、脂质、花生粉饼等（异养生物）氮源凡是能提供微生物所需氢元素的物质合成蛋白质、核酸及含氮的代谢废物，也可为异养微生物提供能源无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐，自养生物有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等，异养生物水分生物体内含量最高的组分，分结合水和自由水良好的溶剂、细胞生活及生化反应的介质，参与物质运输及参与生化反应的反应物培养基、大气、代谢废物无机盐为微生物提供大量除C、H、O以外的各种元素细胞组成成分，生命调节物质，自养菌的能源或其他营养来源，酶的激活剂培养基、大气等环境生长因子微生物正常生长繁殖，必不可少的微量有机物可作为酶与核酸等的组成成分维生素、氨基酸、碱基等【提醒】自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同（1）自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。（2）含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物质，提供能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。2.培养基的配制原则(1)目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等选择原料配制培养基，如培养自养型的微生物就不用加入有机营养物质。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。4.培养基的种类及应用划分标准培养基种类特点应用物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂(如琼脂)微生物的分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；以尿素为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌)鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物(如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌)【提醒】①病毒为非细胞结构的生物体，专营活细胞寄生，目前不能利用人工培养基来培养，需接种在动植物组织中才能增殖。常用于培养病毒的是活鸡胚。②加入培养基中的凝固剂（如琼脂），一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。③选择培养基一般只生长具有特定的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。5.选择培养基的选择方法（1）在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入。（2）改变培养基中的营养成分。例如缺乏氮源是可以分离出固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出消除石油污染的微生物。（3）改变微生物的培养条件。例如，将培养基放在高温环境下培养，可以得到耐高温的微生物。6.培养基的配制（以常用的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基为例）（1）步骤：计算→称量→熔化→灭菌→倒平板。二、无菌技术1.目的：获得纯净的培养物。2.关键：防止外来杂菌的入侵。3.方法——消毒和灭菌项目概念常用方法应用的范围消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法：在100 ℃下煮沸5～6 min一般物品巴氏消毒法：70～75 ℃煮30 min或在80 ℃下煮15 min一些不耐高温的液体，如牛奶化学药剂消毒法用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线消毒法：30 W紫外灯照射30 min接种室灭菌使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)灼烧灭菌：酒精灯火焰接种工具的灭菌干热灭菌：160～170 ℃下灭菌1～2 h玻璃器皿、金属工具的灭菌高压蒸汽灭菌：121 ℃下灭菌15～30 min培养基及容器的灭菌【提醒】①消毒只能消灭或抑制营养体的活动，而不能达到彻底灭菌。酒精消毒用体积分数为70%的酒精效果最好。因浓度过高，会使菌体表面蛋白凝固成一层保护膜，乙醇分子不能进入其中；浓度过低，杀菌力减弱。而灭菌除杀死营养体外，还必须杀死芽孢和孢子。②灭菌消毒的原理，就是通过一定理化手段，使病原菌蛋白质变性，失去生命活性。三、微生物的筛选1.筛选原则：人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。2.筛选微生物的两个实例比较比较项目土壤中分解尿素的细菌的分离分解纤维素的