多杀巴氏杆菌病实验室诊断(1)(1).pptVIP

实验三 多杀巴氏杆菌病的实验室诊断 （一）病鸡剖检及细菌学检查 实验目的 1. 掌握禽霍乱病鸡的检查和剖解方法 2．掌握禽霍乱组织涂片、染色和镜检的步骤和方法 3. 熟悉多杀性巴氏杆菌两极染色的形态特征 4．掌握病原菌分离培养的操作方法 仪器和材料 1．仪器：解剖刀、骨钳、镊、解剖板、脸盆，毛刷、器皿、剪刀、镊子，接种环，酒精棉，酒精灯，显微镜，载玻片，革兰染色染料（草酸铵结晶紫、革兰氏碘液、95％乙醇、蕃红染液），瑞氏染液，香柏油等。 2．实验材料：多杀性巴氏杆菌感染病死鸡 。 3．培养基：鲜血营养琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基 操作步骤和方法 1．无菌取病鸡病变组织（肺、肝、脾……），接种鲜血营养琼脂和麦康凯琼脂，将培养皿标记后置37℃温箱，培养24小时后观察结果。 2. 病料涂片 用镊子夹持病变组织，用灭菌剪刀剪取一小块，在载玻片触片。当触片干燥后，进行染色检查. 3.剖检变化观察。 附：瑞特氏染色法： 在干燥的抹片上，按抹片点大小盖上一块略大的滤纸，其上滴加染液，略浸过滤纸，并视情况补滴，维持湿润状态、染色1～2分钟，然后滴加等量缓冲液，使之与染色液均匀混合，作用2~3分钟，至生出金属光泽，直接以水冲洗，吸干后镜检观察。 思考题 1．掌握禽霍乱的临床症状及病理变化的特征。 2．掌握多杀性巴氏杆菌两极染色方法。