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第二章 培 养 基 授课教师；贺立虎 抗生素生产用的培养基是供抗生素产生菌生长、繁殖、代谢和合成抗生素用的按一定比例组成的复合营养物质。 培养基内各种营养物质的组成和比例对产生菌的生长、代谢、合成抗生素的能力以及产品的产量、质量均有很大的影响，由此会影响提炼工艺。 培养基有两个主要营养因素: （一）供菌体细胞代谢过程所需的能源。 利用太阳光照射的能源的菌类，称之为光 能利用菌。 多数微生物只能利用各种化合物贮存的化 学键能，称之为化能利用菌。 （二）构成微生物细胞物质或产物的各种 元素。 第一节 培养基的成分及其功能 培养基成分中，按其性质和作用，可分为： 碳源 氮源 无机盐 微量元素 前体 促进剂或诱导剂 消沫剂 通常用作碳源的物质有： （一） 糖类 （二） 脂肪 （三）有机酸 (一)糖类 按糖类可被微生物利用的速度排列，则一般为己糖双糖戊糖多糖，但这一顺序对所有微生物并非都是一样的。 1．单糖 2．双糖 3．多糖 1．单糖 (1)木糖在发酵工业领域的应用 木糖培养基仅用于葡萄糖异构酶的生产。木糖既可作为单独的碳源，也可在含马铃薯淀粉、玉米淀粉、葡萄糖或甘油的复合培养基中作为诱导剂。 (2)葡萄糖是各种发酵过程常用的碳源 葡萄糖可以由玉米淀粉或马铃薯淀粉，经酸或酶水解制取。 工业葡萄糖最常见的是一水右旋糖，它经常用于生产抗生素、甾类化合物、氨基酸、丁酸、衣康酸、酒石酸、黄原胶、杂多糖。 2．双糖 蔗糖和乳糖是以纯粹制品或以分别含有这两种糖的糖蜜和乳清用于工业发酵。 麦芽糖则以麦芽、麦芽提取物的形式应用。 (1)蔗糖 国外工业上生产柠檬酸均用纯净商品蔗糖作为主要基质。 乳酸也由蔗糖来生产。 蔗糖还可作为生产L—色氨酸、麦角碱、6—磷酸葡萄糖脱氢酶、L—赖氨酸、金霉素、黄原胶的复合培养基中的碳源。 蔗糖多数是以糖蜜的形式供应。 (2)糖蜜 发酵工业最重要的原材料之一，它们是甜菜糖和蔗糖生产过程的副产物，分别称为甜菜糖蜜或蔗糖糖蜜。 甜菜糖蜜是棕色浆状液体，含有约50％蔗糖。 蔗糖糖蜜在发酵工业上应用的有精制糖蜜和原料糖蜜两种，后者称为赤糖糊糖蜜。 (3)乳糖培养基 用乳糖作为碳源，对抗生素生物合成很少有抑制作用，因此能在高浓度条件下应用。 乳糖常用于抗生素生产，尤其在青霉素生产中广为应用。 (4)乳清 从牛乳制得，当制取乳酪时，除去脂肪和酪蛋白后，便得到乳清。 在工业生产上，乳清主要用于制取菌体蛋白质饲料，部分用于生产乙醇。 3．多糖 (1)淀粉 一般以纯净的无定形粉末供各方面应用，也有以马铃薯、小麦、燕麦、大麦、高梁、玉米谷子等制成的粉末供应用。 淀粉是最重要的植物碳水化合物。具有典型的小颗粒结构。颗粒不溶于水，能被微生物缓慢分解，膨化淀粉可作为多种微生物的碳源。 (2)糊精 糊精是α—淀粉酶降解淀粉的产物，喷干成干物。 糊精和葡萄糖一起在培养基中作为碳源或单独作为碳源，已应用于多种抗生素生产。 (3)纤维素 纤维素在植物细胞壁中，以结晶形态和半纤维素、木质素并存，三者比例约为4：3：3，它是单一的葡萄糖聚合体。 半纤维素则是戊糖(木糖、阿拉伯糖)、己糖(甘露糖)和各种糖酸的混合多聚体。 结晶纤维素在细胞壁中由于其周围存在着木质素的屏障而能抗拒水解。 半纤维素则容易被酸或碱，酶水解成单糖或寡多糖。 (二)脂肪 动植物的油类和脂肪常和碳水化合物一起作为碳源。 油类在贮藏过程中、酸值增加，酸值大于10抑制四环素的生物合成。 在贮藏过程中，还可增加过氧化物含量，这对青霉素生物合成有不利影响，对金霉素和L—赖氨酸生物合成也有不利影响。 (三)羧酸 1．醋酸 醋酸作为廉价碳源用于微生物工业。 微生物合成氨基酸中应用醋酸有许多报道。 2．不饱和脂肪酸 不饱和脂肪酸，如油酸、十八碳烯酸，在培养基中加入50～100mg/L生产谷氨酸。 油酸还可用来生产灵菌红素。 二、氮 源 主要用来构成菌体细胞物质(氨基酸、蛋白质、核酸)和含氮代谢产物(如抗生素等)。 常用的氮源可分为两大类： (一)有机氮源 1．尿素 很适用的氮源，用来制备培养基，可使培养基具有一定的缓冲能力。由于在加热灭菌时的不稳定性，在生产上使用受到一定限制。 2．动、植物粉类 3．玉米浆 2．动、植物粉类 黄豆粉、棉子粉、菜子粉、玉米粉和鱼粉等在生产上是制备培养基时常用的氮源。 鱼粉是鱼或鱼的废料经粉碎干燥而成。 别的粉类则是除去油后的饼粉，含有蛋白质、碳水化合物和少量残留脂肪。 （1）黄豆粉