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第 二 军 医 大 学 学 报 ； （） ２００７Ｓｅ ２８ ９ · · ｐ １０１１ 　 　 ＡｃａｄＪ Ｓｅｃ Ｍｉｌ Ｍｅｄ Ｕｎｉｖ ·技术方法· 腺病毒ＣＮＨＫ２００ｈＥｎｄｏｓｔａｔｉｎ质量控制方法的研究 薛惠斌，施军霞，朱文川，陈 敏，钱其军 　 （第二军医大学东方肝胆外科医院基因病毒治疗实验室，上海 ） ２００４３８ ［摘要］ 建立基因 病毒治疗系统 的质量控制方法。 分别建立腺病毒蛋白鉴定、腺病毒 目的：  ＣＮＨＫ２００ｈＥｎｄｏｓｔａｔｉｎ 方法： 　 基因组鉴定、人内皮抑 （ ）基因鉴定、人内皮抑素表达量检测、腺病毒颗粒数测定、腺病毒滴度和比滴度测定、纯度 ｈＥｎｄｏｓｔａｔｉｎ 测定、野生型腺病毒（ ）检测、残余宿主 含量检测和牛血清蛋白残余量检测等腺病毒质量控制项目的方法，并对纯 ＡｄＷＴ ＤＮＡ 化的腺病毒样品进行初步检测。 建立用 方法对腺病毒进行蛋白鉴定，用限制性内切酶图谱分析的方法对腺 结果： ＳＤＳＰＡＧＥ 病毒进行基因组鉴定，用ＰＣＲ方法鉴定人内皮抑素基因，用ＥＬＩＳＡ 方法检测人内皮抑素表达量，用Ｄ 法和 ＨＰＬＣ 方法进行 ２６０ 腺病毒颗粒数测定，用 ／ 方法和 方法进行纯度检测，用 方法进行野生型腺病毒检测，用杂交方法进行残余 Ｄ Ｄ ＨＰＬＣ ＰＣＲ ２６０ ２８０ 宿主ＤＮＡ含量检测，用反向间接血凝实验测定牛血清蛋白残余量。结果表明建立的方法可有效应用于腺病毒样品检测，并且 我们制备的纯化腺病毒样品均符合要求。 基本建立了腺病毒 的质量控制方法，改良的应用 结论： ＣＮＨＫ２００ｈＥｎｄｏｓｔａｔｉｎ ＨＰＬＣ对腺病毒颗粒数进行定量检测的方法准确迅速，优于传统方法。应用建立的方法对纯化的腺病毒样品进行检测，基本 符合临床应用要求。 ［关键词］ 腺病毒科；内皮抑素类；基因疗法；质量控制 　 ［中图分类号］ ［文献标识码］ ［文章编号］ （ ） Ｑ７８２ Ａ ０２５８８７９Ｘ ２００７０９１０１１０４ 　 　　　 　 　　　 　 ｕａｌｉｔ ｃｏｎ