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HLA 基因检测;1. HLA 和HLA分型检测;1. HLA 和HLA分型检测;什么是HLA MHC、HLA、亚型、关联 什么是HLA分型 I型，II型，III型，IV型 HLA分型与疾病检测 骨髓与器官移植，免疫性疾病，代谢性疾病，神经内科疾病，骨科疾病等; 人类白细胞抗原 human leukocyte antigen , HLA ;1940年代，Snell和Gorer 小鼠间的肿瘤及皮肤移植试验发现： 决定小鼠间移植排斥与否（即组织相容性）的基因位于17号染色体短臂 命名为组织相容性-2（H-2） ;1950年代Dausset 经产妇血清进行个体之间抗体与白细胞 凝集和细胞毒试验 发现人的MHC，命名为HLA 基因位于第6号染色体短臂 ;1960年代，Benacerraf 不同品系的豚鼠对一些抗原的免疫应答能力比较发现： 控制机体对不同抗原的免疫应答能力的基因（Ir基因）位于MHC基因复合体内。;Benacerraf、Dausset和Snell三位科学家 分别从不同角度对MHC的免疫遗传学进行的开拓性研究， 荣膺1980年的诺贝尔医学和生理奖。 ;HLA共分为4型：I型分子包括HLA-A、HLA-B和HLA-C，广泛存在与各种组织细胞中； II型分子包括HLA-DP、HLA-DQ和HLA-DR，存在于B细胞、巨噬细胞和活化T细胞中； III型分子为补体系统，包括C2和C4位点，存在于血清中； IV型分子可能是一些分化抗原，只存在于淋巴细胞、某些细胞毒性T细胞和白细胞中。; HLA基因系统的多态性及一些主要基因座位的等位基因数 正式命名显示多态性的HLA基因座位有31个，共2 320个等位基因。? 图中所示为常见基因座位的等位基因数。 及一些主要基因座位的等位基因数 正式命名显示多态性的HLA基因座位有31个，共2 320个等位基因。? 图中所示为常见基因座位的等位基因数。;HLA分型的基本检测方法： 细胞学方法测抗原特异性（型） 血清学方法测抗原特异性（型） （微量淋巴细胞毒试验） 分子生物学方法测等位基因 PCR/SSP PCR/Luminex PCR/SBT PCR/二代测序 PCR/流式细胞仪;HLA抗原和等位基因命名:;例如HLA-B27;Loci Considered to be Matched ;*; 常见HLA与疾病关联 疾病 HLA抗?? 相对风险 ————————————————————————— 强直性脊椎炎 B27 89.8 Behcet综合征 B51 10-15 多发性硬化症 DR2 4.8 乳糜泻 DR3 10.8 Grave’s病 DR3 3.7 系统性红斑狼疮 DR3 5.8 类风关 DR4 4.2 胰岛素依赖型糖尿病 DR3/DR4 25.0 重症肌无力 DR3 2.5 ;小结;1. HLA 和HLA分型检测;HLA 基因分型 ;rSSO Luminex bead for class I class II;*;Illumina Sequencing by Synthesis (SBS) chemistry;Pacific Biosciences - Single-molecule real-time sequencing;*; Sanger 测序原理 ;Sanger 测序原理 ; Sanger 测序原理 ;HLA分型模板的扩增;Long PCR to amplify the target gene;Assembly and Alignment;Problems in sequence assembly;Amplicons - HLA Coverag