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转化转化、、转导与接合转移转导与接合转移 最终受体菌最终受体菌 基因转移基因转移 重组重组DNADNA分子分子 微生物遗传操作系统微生物遗传操作系统 《微生物菌种选育》Genetic Improvement on Microorganisms 基因转移 转化Transformation: 细胞从环境中摄取DNA。只 有有 ““感受态感受态””细胞才能摄取细胞才能摄取DNADNA。 转导Transduction: 病毒感染一个细胞后部分宿主 DNADNA被包到新生病毒粒子中被包到新生病毒粒子中，该病毒粒子再感染另该病毒粒子再感染另 一个宿主细胞从而引起基因重组的现象。 接合接合Conjugation:Conjugation: 一个细菌个细菌通过细胞间的直接接触通过细胞间的直接接触 将DNA转到另外的细菌中，接合需要特殊的质粒辅 助助。 转化 Transformation 细菌细胞处于可被细菌细胞处于可被DNADNA转化的状态称为感受态转化的状态称为感受态。 处于感受态的细胞表面有处于感受态的细胞表面有DNADNA受体和其他特异的转化蛋白受体和其他特异的转化蛋白。。 (1)(1) 自然感受态自然感受态： ((2)) 化学感受化学感受态： (3) 电转化/ 电穿孔 (4) 原生质体转化 接合转移 Conjjuggation 指两个细胞通过直接接触或桥状结构进行基因转 移的过程移的过程。。 接合转移需要利用质粒编码的功能辅助。 http://strubi.uni-graz.at/projects/index.html 接合转移质粒 Conjugative plasmid 含有接合转移质粒的细菌才能发生接合转移。 大肠杆菌大肠杆菌FF质粒质粒 大肠杆菌大肠杆菌RK2/RP4质粒质粒 农杆菌Ti质粒 接合转移的基本元件 1. 接合起始区origin of transfer ( oriT or mob) ：位于待接合 的质粒上的质粒上。 22. 接合转移基因接合转移基因((tratra genes):genes): tra基因可以位于待接合的质粒上，也可以位于供体菌的另 一个质粒个质粒，甚至可以位于细菌基因组上甚至可以位于细菌基因组上 。 转转 导导 Transduction 细菌利用噬菌体通过转导作用 将基因组DNA转 移到另移到另一个细菌中个细菌中。 转 染 Transfection 当细菌的转化过程中吸收的外源DNA是 病毒DNA时此过 程就应该称为转染程就应该称为转染。。区别于区别于 “感染感染”，，后者指病毒颗粒借助后者指病毒颗粒借助 于胞外受体吸附到细胞，并将DNA注入细胞。 而对于真核生物，转染就是原核生物中转化的同义词。 之所以在真核生物中使用之所以在真核生物中使用 “转染转染” 这个词来代替这个词来代替 “转化转化”，， 是因为人们之前已经习惯了用转化这个词表示真核细胞变为 恶性细胞的过程恶性细胞的过程。。 原生质体及原生质体及 原原生质体融合质体融合 《微生物菌种选育》Genetic Improvement on Microorganisms 原生质体概念原生质体概念 Protoplast: 用溶菌酶除用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制细胞壁原有细胞壁或用青霉素抑制