激光显微切割技术切割棉花单条染色体的探究.pptxVIP

欲切割的目标染色体未被切割；（b）箭头所示为切割路径，表明目标染色体己经被切割分离；（c）箭头所示为目标染色体被切割收集后留下的空白;处，表明目标染色体己经被黏性Eppen-光显微切割系统切割植物染色体时，能清楚地判断所切割的目标染色体是否被切割、分离和收集。2.2;单条染色体DNA的DOP-PCR微量扩增对所收集的亚洲棉单条染色体、亚洲棉基因组dof管盖收集。由图枳可，利用SLuCUT全自动sh;in纪NAS和无菌水丨ts首先进行第轮/DOFPCR微扩，利用第1轮DOP-PCR扩增产物，再进行第2轮DOP-琼脂糖电泳，其电泳;图谱见。PCR微扩增，用第1轮和第2轮微扩增产物分别进行DOI-PCR微扩增产物电泳图谱1通过对1亚洲棉单条染色体的切割1分1离荆收;集1ishingHouse.由（a）可见，在2―11泳道（亚洲棉单条染色体）中，多数泳道和第12泳道（阳性对照）均可见DNA产物，而;泳道1（阴性对照水）中未观察到DNA产物；由（b）可见，在泳道211和第12泳道中均有DNA产物可见，而泳道1中未观察到DNA产物，;由此表明，在211泳道中所观察到的DNA产物有可能是来自所切割和收集的亚洲棉单条染色体DNA，同时也验证了DOP-PCR微量扩条件适;于亚洲棉微量DNA扩。2.3单条染色体扩增产物的验证对亚洲棉单条染色体DNA、亚洲棉基因组DNA和无菌水的第2次微扩产物进行琼脂糖电;泳，然后进行Southern杂交，其Southern杂交图谱见。Southern杂交图谱由可见，在311泳道和阳性对照12泳道（亚洲;棉基因组DNA）中，亚洲棉单条染色体DNA和亚洲棉基因组DNA的微扩产物分别与亚洲棉基因组DNA探针产生了较强的杂交信号，而阴性对照;泳道1（无菌水）中却未观察到与亚洲棉基因组DNA探针的杂交信号，由此说明所切割和收集的单条染色体DNA与亚洲棉基因组DNA有同源性，;进而表明所切割和收集的单条染色体的DNA来自亚洲棉基因组DNA.DOP-PCR微量扩，经过琼脂糖电泳和Southern杂交的验证，充;分表明了利用SLuCUT全自动激光显微切割系统能够简单快速高效地完成植物染色体的微切割、微分离和微收集。3讨论SLuCUT全自动激光;显微切割系统（以下简称切割系统）具有操作简单、快速准确、轻污染等特点，主要表现在选择切割路径方便，该切割系统可通过鼠标勾画各种不规则;的形状或者利用多种绘图图形来选择切割目标，因此可实现任意勾画切割目标，而且所切割的样本（目标染色体）不会被降解。该切割系统的激光直径;小于1激光能量、聚焦和切割速度由软件控制，采用的是冷激光切割，激光不与分离样本直接接触，不会因热效应而对DNA、RNA和蛋白等造成降;解并且通过有黏性的收集管盖黏附分离下来的膜和样本提取过程不需要激光轰击，所以对样本没有损伤，且污染较轻。整个操作过程，从切割系统载物;台的移动、切割路径的任意勾画、切割长度的测量、聚焦、激光能量、切割速度，到拍照、保存、收集等都是通过简便易用的UVCUT软件来完成，;所以操作简单易掌握；但镜检细胞不方便，因为该切割系统是通过移动鼠标来控制载物台上下左右移动，移动鼠标远不如普通显微镜的旋转螺钮控制载;物台移动方便。因此，为节省时间必须先在普通显微镜下把镜检到的理想细胞做好标记，以便切割时查找。单条染色体分离和扩使得部分遗传研究从全;基因组水平缩小到单条染色体水平成为可能。因此，染色体微分离和微扩技术自诞生以来，一直受到世界范围内的广泛关注。因为可以根据不同的目的;和用途选择不同的染色体文库进行操作，这比针对整个基因组的操作要有效得多，所以该切割系统将成为基因定位、基因克隆的有利武器，在细胞遗传;学及分子生物3，以手机作为发射机，接收天线为单导线，由天线接收到的感应电流经放大器放大后驱动二极管发光。当手机通话或挂断的时候，通过;二极管的发光程度来判断感应电流的强弱。通过这个实验，学生可以直观地观察到感应电流的形成和传输放大的过程，以及天线不同的放置状态对感应;电流强度的影响。实验原理结束语本文从电场是导体传输电流的条件出发，分析了直流电流只能在闭合回路中传输的原因是为了维持恒定的电场；感应;电流可以在任意形状的导体结构中传输，只要导体内部有时变电常进一步对直流电流和感应电流做了比较，总结了两者的相同点和不同点。最后提出了;一种演示非闭合导体中传导感应电流的实验，加深对感应电流的理解。;转载请注明文章出处，谢谢。