羊乳和牛乳理化特性比较及其掺假检测及研究.docVIP

羊乳和牛乳理化特性比较及其掺假检测的研究 / , / , :? , \羊乳和牛乳理化特性的比较及其掺假检测研究 摘要 乳制品的质量与安全问题的核心就是控制好乳源。本课题对羊乳和牛乳 的蛋白质含量及组分、酒精稳定性和凝乳特性做了比较研究,并且以牛. 乳白蛋白和.酪蛋白为目标蛋白,建立了可以快速、灵敏、准确地检测羊 乳中掺入牛乳含量的直接竞争法。 羊乳和牛乳理化特性比较研究。以脱脂的羊乳和牛乳为样品,通过凯氏 定氮法和.聚丙烯酰胺凝胶电泳测定羊乳和牛乳的蛋白质含量及其蛋白 质组分。测得,羊乳的蛋白质含量高于牛乳的,分别为.±./ 置信度%;两者的蛋白组分也存在一定的差 和.±./ 异,通过图谱可以看出,牛乳的酪蛋白中以一酪蛋白含量最多,而羊乳中 以.酪蛋白含量最多。准备原料乳、巴杀乳和冷冻复融乳乳样,测得羊乳乳 样的酒精稳定性值依次为、:、%,Ⅳ,凝乳时间依次为 士、 、;牛乳乳样的酒精稳定性值依次为、、 %,Ⅳ;凝乳时间依次为、、。实验证明, 羊乳的胶体稳定性比牛乳的差。 兔抗牛.乳白蛋白和.酪蛋白抗体的制备与特性研究。以牛.乳白蛋 白和.酪蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,采集高效价血清。依次采用饱 和硫酸铵分级沉淀法和蛋白亲和色谱法纯化血清抗体,得到纯化兔抗牛 【一.和..样品。效价均可达到,蛋白质含量分别为 %、.%。硫氰酸铵洗脱法测 ./,./,纯度分别为. /, 得仅..和仅..对.的亲和力指数分别为./、. /、. 对.的亲和力指数分别为. /。...特异性很 好,...与.和存在一定交叉反应,两种抗体均与羊乳 存在一定的交叉反应。经抗体修饰技术处理后,这些交叉反应均明显降低。 牛乳.乳白蛋白和.酪蛋白的酶标记。选用辣根过氧化物酶,通过过 碘酸钠氧化法分别标记.乳白蛋白和.酪蛋白。结果显示,当与【. 的分子个数比为.:时,标记效果比较好结合率.%,标记率.%: .的分子个数比也为.:时,标记效果比较好结合率.%,标记率.%。经检测,酶标抗原的效价分别可以达到:和:。 直接竞争方法的建立。棋盘滴定法确定抗体最佳包被浓度 ??.和???分别为:,:和酶标抗原最佳稀释 浓度都为:。确定封闭液%的体积为“,封闭时间为。脱 脂乳的最佳稀释度为:。用...和.。【..分别建立直接 竞争法检测羊乳中掺入的牛乳含量。经评价指标分析,该方法的检 测线性范围都为%%/,最低检测限分别为.%和%,变异系数 小于%。 本研究通过羊乳和牛乳的理化特性及其胶体稳定性的比较,为科学合理 地利用羊乳,生产具有独特功能的羊乳制品提供了理论依据;建立的基于牛 乳.和?的直接竞争检测法,特异性、重复性、敏感性都比 较高,可以作为检测羊乳及其制品中掺入牛乳检测的技术手段。 关键词:竞争,兔血清抗体,.乳白蛋白,.酪蛋白,羊乳,牛乳 ..,.,,. ?. .. 一王. . . ’. / ./ % . . . .,.,. .,.,.%Ⅳ, , ., ,., . . . . . ’. ?,:, ./。 . ./, %,.%,. ?.. 一?../ . . /: 嘶 . . / ./. ... . .. . .,. 仅. ....:. .%, .%; ., .:, .%. .%, : : . : ... ; :: ... . % . :.. ?? . % % Ⅳ. .% % %.;,. , : 八?, 符号说明 英文全名 中文译名 英文缩写 .乳球蛋白. .乳白蛋白 . .酪蛋白 . . .酪蛋白静 静酪蛋白 高效液相色谱曲 气相液相色谱 气相色谱乙二胺四乙酸 血清抗体 聚合酶链式反应道尔顿十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰铵凝胶电泳’ 不完全弗氏佐剂 ’ 完全福氏佐剂 牛血清白蛋白酶联免疫吸附试验辣根过氧化物酶 四甲基联苯胺 ,’,, 匝 微过滤 四甲基乙二胺 ,,’, 目录 摘要??.? 符号说明? 前言.. .课题研究的目的和意义??。 .羊乳和牛乳蛋白组分的比较研究??。 ..乳清蛋白??一 ..酪蛋白? .羊乳和牛乳胶体稳定性研究进展..乳的酒精稳定性. ..乳的热稳定性? ..乳的凝乳特性.羊乳中掺入牛乳检测方法的研究进展 ..电泳技术. ..色谱技术 .. 技术??一 ..免疫学技术??. .酶联免疫吸附法? .. 的检测原理.. 的分类及特点一 .抗原的酶标记? ..标记用酶??.. ..标记方法??。 .本章小结??.. ..课题主要研究内容?一 ..研究总体设计思路 实验部分.羊乳和牛乳理化特性检测?. ..技术路线 ..实验材料. ..实验方法??。..结果?.. ..小结.免疫及兔抗牛.和.血清抗体的制备及其特性检测?.. ..技术路线 ..实验材料. ..实验方法 ..免疫及的制备及其特性检测