遗传实验1有丝分裂课前讲解ppt课件.pptVIP

植物有丝分裂的制片与观察 王飞 2012.10 实验目的 掌握植物根尖细胞有丝分裂的制片技术 观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征，找出有丝分裂各个时期的代表性细胞，总结有丝分裂过程中染色体的动态变化。 实验材料及流程 大蒜 2n=16 生根-取材-固定- 解离-漂洗-染色-压片-镜检 1.根冠 2.分生区 3.伸长区  水培生根（已完成） 取材（已完成） 根尖部位 1.5-2cm 长 固定（已完成） 目的：终止细胞生长过程及一切生理生化反应，维持细胞结构不变 方法：Carnoy固定剂（3份95%乙醇，1份乙酸），处理2-4h 原理：迅速穿透细胞致死，乙醇-脱水收缩 乙酸-膨胀 解离 目的：破坏细胞间果胶质和纤维素，使细胞容易散开 方法：1M HCl 烧杯60℃预热 处理5min 注意：每组统一用纱布取根尖样本，流水漂洗数秒，转移样本到烧杯内并计时 漂洗 目的：去除残留的盐酸，恢复低渗环境 方法：纱布内用蒸馏水或清水漂洗干净，之后在平皿中浸泡待用 剥离分生组织 1 截取3mm左右根尖区域，置于载玻片上 2滤纸吸干多余水分后用解剖针去除半透明状非分生组织，留取白色分生组织 注意：宁滥毋缺 染色 染色液：石碳酸品红（卡宝品红），染色质特异染料 步骤： 1 滴加1-2滴染色液 2 染色5min 压片 单侧慢放盖玻片（领取） 滤纸吸干多余液体 镊子轻敲使细胞分散 如镜检发现细胞分散不完全可重复按压细胞 镜检 10倍或4倍镜锁定目标细胞 40倍镜观察细节并绘图 光栅、光源、镜头洁净度、细胞分散度、使用记录 各个时期细胞实物图及手绘图 前期 间期 中期 后期 末期 前中期 注意事项 操作盐酸和染液时要小心不要接触皮肤，不要溅到实验台或显微镜上 酸解时间不要过长 压片不要用力太猛 显微镜使用规范 实验报告要求 课上完成实验记录（实验步骤，现象），教师签字 课后补充完成全部实验报告（目的，原理，结果，讨论等其他细节） 实验结果的要求：每个时期的细胞图片（照片或手绘） ，各时期特点 讨论部分：针对实验过程细节及个人实验结果自由讨论、禁止抄袭！ 下次课统一由班长上交